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江蘇菲亞生物科技有限公司
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ELISA試劑盒在臨床實(shí)驗(yàn)室中
2017-3-9 閱讀(860)
ELISA試劑盒從臨床應(yīng)用角度考核檢修試劑的可靠性，是以其能否區(qū)分健康與疾病的能力作為依據(jù)的。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外，對試劑的機(jī)能，如特異性、敏捷度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定，通過對一系列參比品的檢測，結(jié)果符合要求者才為合格。部臨檢中央對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作，通過質(zhì)量評價(jià)，促進(jìn)了試劑質(zhì)量的進(jìn)步。進(jìn)行這種評價(jià)，首先需要收集有關(guān)的病人血清，然后用*的檢測該項(xiàng)標(biāo)志物zui可靠的試劑進(jìn)行測定，以確定其為陽性或陰性。目前還很難找到100%可靠的試驗(yàn)，任何試驗(yàn)都會(huì)泛起假陽性或假陰性。這一組表明測定物為陽性或陰性的血清組成"血清盤"（panel）。小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中如何正確溫育
溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。
溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘～1小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1～2小時(shí)才能有較*的結(jié)合，低于1小時(shí)，可能會(huì)影響測定下限。因此，關(guān)于溫育，在實(shí)際測定操作中一定要注意以下幾點(diǎn)：
ELISA試劑盒要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來說，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí)，孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需要一定的時(shí)間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下，這段升溫時(shí)間可能還比較長，而在臨床實(shí)驗(yàn)室中，很少有人注意這個(gè)問題，通常是將微孔板一放入恒溫箱即開始計(jì)時(shí)，這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育的時(shí)間不夠，弱陽性樣本測不出來的問題。
