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當(dāng)前位置:上海仁捷生物科技有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>ELISA試劑盒的操作步驟如下
ELISA試劑盒親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中獲取。分子量60kD,每個(gè)分子由4個(gè)亞基構(gòu)成,能夠和4個(gè)*分子密切。如今使用更多的是從鏈霉菌中獲取的鏈霉親和 素。*又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物,ELISA試劑盒*-羥 基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的巨細(xì)分子構(gòu)成*化的產(chǎn)品。親和素與*的,雖不屬免疫反響,但特異性強(qiáng),親和力大, 兩者一經(jīng)就極為安穩(wěn)。因?yàn)?個(gè)親和素分子有4個(gè)*分子的方位,能夠銜接更多的*化的分子,構(gòu)成一種類似晶格的復(fù)合體。因而把親和素和生物 素與ELISA偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
ELISA試劑盒因而于固相的酶標(biāo)抗原量與ELISA試劑盒受檢抗原的量成反比。
(1)將特異抗體與固相載體銜接,構(gòu)成固相抗體。洗刷。
(2) 待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反響。如受檢標(biāo)本中無抗原,則酶標(biāo)抗原能順暢地與固相抗體。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則 與酶標(biāo)抗原以相同的時(shí)機(jī)與固相抗體,競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體的時(shí)機(jī),使酶標(biāo)抗原與固相載體的量削減。參閱管中只加酶標(biāo)抗原,保溫 后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的可達(dá)zui充沛的量。洗刷。
(3)加底物顯色:參閱管中因?yàn)榈拿笜?biāo)抗原zui多,ELISA試劑盒故色彩zui深。參閱管色彩深度與待測(cè)管色彩深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管色彩越淡,表明標(biāo)本中抗原含量越多。
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