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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠轉(zhuǎn)化生長因子βelisa檢測試劑盒?操作流程
2022-5-12 閱讀(144)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子βelisa檢測試劑盒操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人淋巴內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基
人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基
人外周血白細胞*培養(yǎng)基
人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基
人乳腺上皮細胞*培養(yǎng)基
人乳腺成纖維細胞*培養(yǎng)基
人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基
人胰島β細胞*培養(yǎng)基
人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人前列腺成纖維細胞*培養(yǎng)基
人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基
人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基
人胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基
人淋巴內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基
人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基
人外周血白細胞*培養(yǎng)基
人食管上皮細胞*培養(yǎng)基
人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人腸微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基
