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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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豬食欲素受體（OXR）ELISA試劑盒操作步驟
2021-9-15 閱讀(143)
豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
| 蛋白激酶A5受體抗體 |
| 上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體 |
| 癌基因ETS2抗體 |
| 內(nèi)皮素3抗體 |
| 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 |
| 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 |
| 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶4抗體 |
| 腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 |
| 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體 |
| CD312抗體 |
| eIF4E結(jié)合蛋白抗體 |
| 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 |
| 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 |
| 肝配蛋白A1受體抗體 |
| 真核翻譯起始因子2C2抗體 |
| 眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體 |
| EYA4蛋白抗體 |
| 血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體 |
| 吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白2抗體 |
| 紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 |
| 磷酸化紅細(xì)胞生成素受體抗體 |
| 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體 |
| 膠質(zhì)細(xì)胞運(yùn)載蛋白4抗體 |
| erbB3結(jié)合蛋白1抗體 |
| 烯酰水合酶1抗體 |
| 烯酰水合酶含結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 |
