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上海莼試生物技術有限公司
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人CREB調節(jié)轉錄輔激活因子2實驗步驟
2021-10-28 閱讀(225)
人CREB調節(jié)轉錄輔激活因子2實驗步驟：
1.標本的采取和保存
可用作 ELISA測定的標本十分廣泛體液(如血清)、分泌物(唾液)和排池物(如尿液、業(yè)便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成
有些標本可直接進行測走(如血清、尿液),有些則需經預處理(如龔便和某些分泌物)。大部分 ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有
除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在 ELISA中血漿和血清可
血清標本可按常規(guī)方法采集應注意避兔溶血
細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質以HRP為標記的 ELISA;測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
2.試的淮備:
按試劑盒說明書的要求注備實驗中需用的試劑。 ELISA中用的蒸餾水或去離子水包括用于洗滌的應為新鮮的和高質量的。自配的中液
應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試剤應待溫度與室溫平衡后使用。試剤盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存
在 ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加加酶結合物加底物。加樣時應將所加物加在 LEISA板孔的底部避兔加在孔壁上
出不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器按規(guī)定的量加入板孔中。毎次加標本應更換吸嘴以兔發(fā)生交叉污染也可用一次性的定量塑
料管加加樣。有此測定(如司接法EISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液再在其中加入
血清標本然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器使加液過程迅速完成。
4:呆溫:
在 ELISAI中一般有兩次抗原抗體反應即加標本和加加結合物后?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間這一保溫過程稱為溫育(i
ulation),有人稱之為孵育,在 ELISA中似不恰當。 ELISA固相兔疫測定抗原、抗體的結合只在國相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為逐步平衡的過程因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的毎標記抗體與同相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么 ELISA反應
總是需要一定時間的溫育。
5.洗淙:
洗滌在 ELISA過程中雖不是一個反應步張但卻也決定著實驗的成敗。 ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和姞合的標記物的目的。通過洗
以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。
細胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體
膜粘連蛋白8抗體
水通道蛋白8抗體
錨蛋白重復結構域蛋白40抗體
凋亡抑制因子5抗體
水通道蛋白-3抗體
載脂蛋白D抗體
丁?；铣擅?抗體
脂肪細胞源性氨基肽酶抗體
線粒體凋亡誘導因子2抗體
ABL2蛋白抗體
血管緊張素轉換酶ACE1抗體
血管緊張素轉換酶2抗體
Acinus抗體
醋酸激酶1抗體
促腎上腺皮質激素抗體
促腎上腺皮質激素ACTH抗體
促腎上腺皮質激素ACTH 抗體
活性依賴的神經保護肽抗體
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體
α1酸性糖蛋白2抗體
磷酸化水通道蛋白2抗體
細胞轉氨酶抗體
抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體
ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體
醛糖還原酶抗體
