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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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避免大鼠elisa試劑盒洗板產(chǎn)生氣泡的方法？
2018-3-26 閱讀(83)
在大鼠elisa試劑盒的操作過程中，因試劑盒、操作方法等因素會對實驗有著輕重不一的影響。今天上海恒遠生物技術(shù)整理出幾條實驗經(jīng)驗，這樣能避免Elisa洗板產(chǎn)生氣泡，您竟然還不知道？
1.可以用tip吸走，但實驗中費事、效果還不是很理想；
2.采用更好材質(zhì)的板、或采用專門的96孔板振蕩器，需要花費更多的錢；
3.使用注射器針頭扎破，費事(同方法1)。
4.建議：我們覺得zui簡單方便的一種，是使用吹風(fēng)機(理發(fā)店吹頭發(fā)帶加熱的那種)，將吹風(fēng)機打開，并調(diào)節(jié)到zui高溫度，對96孔板吹1-2秒就可以了。
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃放置一個晚上。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.大鼠elisa試劑盒終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在Elisa檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-beta-Arrestin 1 磷酸化β抑制蛋白1抗體
Phospho-Aurora A 磷酸化有絲分裂激酶A抗體
phospho-APS 磷酸化APS抗體
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體
大鼠elisa試劑盒
