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公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細(xì)胞的訂購信息：

英文簡稱：KARPAS-422細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：類B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：

生長特性：

特征特性：

培養(yǎng)條件：

傳代方法：

貨號(hào)：CS-X64061
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

注意事項(xiàng)：
（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞在對數(shù)生，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
磺基轉(zhuǎn)移酶(PST)檢測試劑盒英文名稱：PST ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框9抗體包裝1g

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)檢測試劑盒英文名稱：SOD3 ELISA Kit腫瘤高表達(dá)周期相關(guān)蛋白抗體包裝25g

半乳糖凝集素9(GAL9)檢測試劑盒英文名稱：GAL9 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框117抗體包裝5g

半乳糖凝集素7(GAL7)檢測試劑盒英文名稱：GAL7 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框120抗體包裝1g

半乳糖苷酶β(GLβ)檢測試劑盒英文名稱：GLβ ELISA Kit補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體包裝25g

半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒英文名稱：GLα ELISA Kit補(bǔ)體C1qγ鏈多肽抗體包裝5g

半乳凝素8(GAL8)檢測試劑盒英文名稱：GAL8 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶抗體包裝1g

半乳凝素6(GAL6)檢測試劑盒英文名稱：GAL6 ELISA Kit老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體包裝5g

半乳凝素4(GAL4)檢測試劑盒英文名稱：GAL4 ELISA Kit質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白3抗體包裝1g

半乳凝素2(GAL2)檢測試劑盒英文名稱：GAL2 ELISA KitComplexin I/復(fù)合素1抗體包裝5g

半乳凝素12(GAL12)檢測試劑盒英文名稱：GAL12 ELISA KitComplexin II/復(fù)合素2抗體包裝1g

半豐富血管生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)檢測試劑盒英文名稱：CYR61 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPγ抗體包裝25g

半蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測試劑盒英文名稱：CST3 ELISA Kit質(zhì)連接蛋白2抗體包裝5g

白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)檢測試劑盒英文名稱：LECT2 ELISA KitCD20抗體包裝100g

白細(xì)胞衍生趨化因子1(LECT1)檢測試劑盒英文名稱：LECT1 ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框40抗體包裝500g
KARPAS-422細(xì)胞Androstenedione（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)1號(hào)染色體開放閱讀框41抗體包裝100ml

Argatroban（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Saracatinib(AZD0530)1號(hào)染色體開放閱讀框144抗體包裝500ml

Atipamezole HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Secnidazole4號(hào)染色體開放閱讀框3抗體包裝1g

Atomoxetine HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Secnidazole組織蛋白酶S抗體包裝1g

Atorvastatin calcium(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sequoyitol死亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝5g

Bambuterol HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sermorelin Acetate前列腺雄抑制信號(hào)蛋白1抗體包裝1g

Beclomethasone Dipropionate...英文名稱： Silver Sulfadiazine磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體包裝5g

Betamethasone Valerate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Silver Sulfadiazine脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體包裝1g

Betamethasone（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Simvastatin19號(hào)染色體開放閱讀框73抗體包裝100g

Bimatoprost（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Simvastatin整合素αM抗體Integrin αM包裝500g

Bleomycin A5 Hydrochloride ...英文名稱： Combretastatin A4 disodium phosphate (CA4P)軸突蛋白4/少突膠質(zhì)抗體包裝100g

Bortezomib(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sisomicin Sulfate軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體（少突膠質(zhì)）包裝25g

Budesonide（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sisomicin Sulfate酪蛋白激酶δ1抗體包裝5g

Candesartan cilexetil(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Somatostatin Acetate活化白粘附分子抗體包裝100g

Carbamazepine（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Streptozocin1號(hào)染色體開放閱讀框191抗體包裝25g
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大小；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。