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英文簡稱：BT474細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；BT474

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮樣；圓形、成團(tuán)

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細(xì)胞系由LasfarguesE和CoutinhoWG建立，源于一名60歲患有浸潤性乳腺導(dǎo)管癌的白人女性的實(shí)體瘤。

培養(yǎng)條件：DMEM/F12+10%FBS(GIBCO)

傳代方法：1:2~1:3傳代；2~3天換液1次。

貨號(hào)：CS-X63405
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞，還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù)，可以向?qū)I(yè)人士咨詢?cè)敿?xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件，凍存方法，及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范：

主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡，co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線。
運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

構(gòu)巢曲霉拉丁屬名: Geotrichum  candidum

(+/-)-兒茶精白地霉用途: 菌

(+/-)-兒茶精阿舒假囊酵母拉丁屬名: Agaricus bisporus

3--4-吡啶雙孢蘑菇拉丁屬名: Streptomyces olivochromogenes

3--4-吡啶橄欖產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus

3--4-吡啶節(jié)桿菌拉丁屬名: Alternaria triticimaculans

甘氨-15N小麥斑鏈格孢拉丁屬名: Wolfiporia cocos

甘氨-15N茯苓菌拉丁屬名: gallinarum

2-氨-5-噻唑雞傷寒沙門氏菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis

2-氨-5-噻唑蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種用途: 食用菌

2-氨-5-噻唑側(cè)耳拉丁屬名: Enterococcus  faecalis

5-溴-2-噻吩羧糞腸球菌拉丁屬名: Pseudomonas  sp.

5-溴-2-噻吩羧假單胞菌屬拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum

5-溴-2-噻吩羧豌豆根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

雙(頻哪合)二毛頭鬼傘，雞腿菇拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

雙(頻哪合)二釀酒酵母拉丁屬名: Pseudonocardia compacta
BT474細(xì)胞先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體苯并芘 BENZO[a]PYRENE(P)Human, Mouse, Rat

血管生成素受體2抗體苯并芘 BENZO[a]PYRENE(P)Human

端粒調(diào)控因子抗體苯酯 BENZOIC ACID METHYLESTER(SG)Human, Mouse, Rat

微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）Tubulinβ苯酯 BENZOIC ACID EUGENYLESTER(SG)Human, Mouse

微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）Tubulin β苯鈉 BENZOIC ACID SODIUM SALT(RG)Human, Mouse

酪氨羥化酶抗體苯鈉 BENZOIC ACID SODIUM SALT(RG)Human

酪氨酶抗體苯乙酯 BENZOIC ACID ETHYL ESTER(SG)Human, Mouse

β10抗體芐索銨 BENZETHONIUM CHLORIDE(RG)Human

粘附分子1抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(P) (AHP Verified)Human