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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鯊魚源性成分（Shark）PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：CP99999
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：熒光-PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
蘋果雙殼菌腫瘤新因子1抗體Human FAM57B ELISA Kit兔子熱休克蛋白27(HSPB1/HSP27)免疫試劑盒

亮白曲霉膽固25α7羥化酶抗體Human FAM65B ELISA Kit兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒

雷夫松氏菌角蛋白3+12抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子橋粒糖蛋白2(DSC2)免疫試劑盒

白酒  酒精度接頭蛋白CrkL抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子前列腺素E2(PGE2)免疫試劑盒

桔綠木霉色素P450 24A1抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前列腺素E1(PGE1)免疫試劑盒

線蟲被毛孢色素P450 2R1抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子前列腺素A2 免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子前列腺素A1 免疫試劑盒

紫紅曲霉鈣周期素結(jié)合蛋白抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒

釀酒酵母7號染色體開放閱讀框69抗體Human FAM72A ELISA Kit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒

塔賓曲霉銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒

釀酒酵母19號染色體開放閱讀框71抗體Human FAM186B ELISA Kit兔子皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

pAAV-RC2異染色體同源蛋白1抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒

蕈狀芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human FAM124B ELISA Kit兔子黏多糖/糖聚糖免疫試劑盒

光黑腹菌抗體Human FAM127A ELISA Kit兔子腦鈉素(BNP)免疫試劑盒

蜂房哈夫尼菌4號染色體開放閱讀款Human FAM127B ELISA Kit兔子內(nèi)皮抑素(ES)免疫試劑盒

草木樨中華根瘤菌凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human FAM129A ELISA Kit兔子內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒
鯊魚源性成分（Shark）PCR檢測試劑盒桑黃Phellinus│linteus (Berk. & M.A. Curtis) Teng 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒N-甲基野靛堿;Caulophyllin

鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumanii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒肌; Inositol

溜曲霉Aspergillus│tamarii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品磷酸化糖原合成酶激酶3試劑盒加蘭他敏;Galanthamine

產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR磷酸化肌球蛋白輕鏈試劑盒甲基;Methyl hesperi

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品磷酸化蛋白激酶C試劑盒京尼平;Genipin

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR磷酸化蛋白激酶B試劑盒伐侖克林;Varenicline

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR淋巴趨化因子試劑盒甲基黃連堿;Worenine chlor

蒼白彎孢Curvularia│pallescens 質(zhì)量規(guī)格：>98%,反式,BR淋巴抗原6復合物基因座A試劑盒吉馬酮;Germacrone

大島芽孢桿菌Bacillus│oshimensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR淋巴功能相關抗原3試劑盒劍麻皂苷元;Tigogenin
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。