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上海莼試生物技術有限公司
主營產品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格，ELISA試劑盒報價 |
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更新時間：2017-06-01 08:10:47瀏覽次數：538
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公司是*的ATCC細胞供應商，提供人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF 的報價，咨詢，稱技術服務，咨詢選購。
細胞名稱 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體 46,XX
使用權限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
IL33 MAb Human IL-33 兔單抗 (FITC) FCM
IL33 MAb Human IL-33 兔單抗 (PE) FCM
FLT1 MAb Human VEGFR1 / FLT-1 兔單抗 (PE) FCM
FLT1 MAb Human VEGFR1 / FLT-1 兔單抗 (FITC) FCM
SPARCL1 MAb Human SPARCL1 兔單抗 (PE) FCM
SPARCL1 MAb Human SPARCL1 兔單抗 (FITC) FCM
AGT MAb Human Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 兔單抗 (PE) FCM
CRABP2 MAb Human CRABP2 兔單抗 (FITC) FCM
CRABP2 MAb Human CRABP2 兔單抗 (PE) FCM
ESAM MAb Human ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 兔單抗 (PE) FCM
MET MAb Human c-MET / HGFR 兔單抗 (PE) FCM
MET MAb Human c-MET / HGFR 兔單抗 (FITC) FCM
MET MAb Human c-MET / HGFR 兔單抗 (FITC) FCM
MET MAb Human c-MET / HGFR 兔單抗 (PE) FCM
CD34 MAb Mouse CD34 兔單抗 (PE) FCM
GBA3 MAb Human GBA3 兔單抗 (PE) FCM
EPCAM MAb Human EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 兔單抗 (FITC) FCM
IL13RA1 MAb Human IL-13RA1 / CD213a1 兔單抗 (PE) FCM
EPCAM MAb Human EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 兔單抗 (PE) FCM
BACE1 MAb Human BACE1 / ASP2 兔單抗 (PE) FCM
CASP14 MAb Human Caspase-14 / CASP14 兔單抗 (PE) FCM
MCAM MAb Human CD146 / MCAM 兔單抗 (PE) FCM
LXN MAb Human Latexin / Lxn 兔單抗 (FITC) FCM
SERPINF2 MAb Human SerpinF2 兔單抗 (FITC) FCM
P4HB MAb Human P4HB 兔單抗 (FITC) FCM
PPM1G MAb Human PPM1G 兔單抗 IHC-P
TXN MAb Human Thioredoxin / TXN 兔單抗 IHC-P
CST3 MAb Human Cystatin C / CST3 兔單抗 IHC-P
CD38 MAb Human SCARB3 兔單抗 IHC-P
CDH17 MAb Human Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 兔單抗 IHC-P
S100P PAb Human S100P 兔單抗 IHC-P
CEACAM1 MAb Mouse CEACAM1 / CD66a 兔單抗 IHC-P
S100A9 MAb Human S100A9 兔單抗 IHC-P
UCHL3 MAb Mouse UCHL3 兔單抗 IHC-P
ACY1 MAb Human ACY1 / Aminoacylase-1 兔單抗 IHC-P
ACE2 MAb Rat ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 兔單抗 IHC-P
AGO2 MAb Mouse AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 兔單抗 IHC-P
ASGR1 MAb Mouse ASGPR1 / ASGR1 兔單抗 IHC-P
CXADR MAb Mouse CXADR 兔單抗 ELISA IHC-P
AFP MAb Human AFP / alpha-fetoprotein 兔單抗 IHC-P
CEACAM5 MAb Human CEACAM5 / CD66e 兔單抗 IHC-P
CNDP2 MAb Mouse CNDP2 兔單抗 IHC-P
AGT MAb Human Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 兔單抗 IHC-P
B2M MAb Human B2M / beta-2 microglobulin 兔單抗 IHC-P
CA9 MAb Mouse Carbonic Anhydrase IX / Car9 兔單抗 IHC-P
ICAM3 MAb Human CD50 / ICAM-3 兔單抗 IHC-P
ICAM3 MAb Human CD50 / ICAM-3 兔單抗 IHC-P
