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上海莼試生物技術有限公司
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更新時間：2017-06-01 08:11:39瀏覽次數(shù)：532
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形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2，Psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317，zui后將PA317產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有抗性，但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:4傳代；2~3天換液1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：9；D16S539：11，12；D18S51：12；D19S433：15，15.2；D21S11：28，30；D2S1338：17，25；D3S1358：16，17；D5S818：12；D7S820：10，11；D8S1179：10，14；FGA：20，22；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：17，18；
同工酶
染色體 57~60
使用權限 A類
上皮細胞樣實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后，將動物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1～2次，離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片，每片滴3滴細胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細胞均勻分散，在酒精燈火焰上來回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項：
1.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
CDH1 MAb Human E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 兔單抗 ELISA
CDH1 MAb Human E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 兔單抗 ELISA
DMP1 MAb Human DMP1 兔單抗 ELISA
TP53 MAb Cynomolgus p53 / TP53 兔單抗 ELISA
FCGR2A MAb Cynomolgus CD32a / Fc gamma RIIA / FCGR2A 兔單抗 ELISA
FCGR2B MAb Cynomolgus CD32b / Fc gamma RIIB 兔單抗 ELISA
CXCL9 MAb Human CXCL9 / MIG 兔單抗 ELISA
CXADR MAb Human CXADR 兔單抗 ELISA
CXADR MAb Human CXADR 兔單抗 ELISA
CTSL1 MAb Human Cathepsin L1 / CTSL1 兔單抗 ELISA
CTSD MAb Human Cathepsin D / CTSD 兔單抗 ELISA
CTSD MAb Human Cathepsin D / CTSD 兔單抗 ELISA
CTLA4 MAb Human CTLA-4 / CD152 兔單抗 ELISA
CTHRC1 MAb Human CTHRC1 兔單抗 ELISA
CHI3L2 MAb Human CHI3L2 / YKL-39 兔單抗 ELISA
CDON MAb Human CDON 兔單抗 ELISA
CD160 MAb Human CD160 兔單抗 ELISA
CD46 MAb Human CD46 兔單抗 ELISA
FCER2 MAb Human CD23 / FCER2 兔單抗 ELISA
CD22 MAb Human CD22 兔單抗 ELISA
CD19 MAb Human CD19 兔單抗 ELISA
CD19 MAb Human CD19 兔單抗 ELISA
CD14 MAb Human CD14 兔單抗 ELISA
CCL15 MAb Human CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 兔單抗 ELISA
MET MAb Canine c-MET / HGFR 兔單抗 ELISA
MET MAb Canine c-MET / HGFR 兔單抗 ELISA
CA13 MAb Human Carbonic Anhydrase XIII / CA13 兔單抗 ELISA
BID MAb Human BID 兔單抗 ELISA
BID MAb Human BID 兔單抗 ELISA
CANT1 MAb Human PLAUR / CD87 / uPAR 兔單抗 ELISA
TREML2 MAb Human TREML2 / TLT-2 兔單抗 ELISA
SIGIRR MAb Human SIGIRR / TIR8 兔單抗 ELISA
SCGB1A1 MAb Human Uteroglobin / SCGB1A1 兔單抗 ELISA
KITLG MAb Human SCF / C-kit ligand 兔單抗 ELISA
SFTPD MAb Cynomolgus SFTPD / SP-D / SFTP4 兔單抗 ELISA
EPHA2 MAb Mouse EphA2 兔單抗 ELISA
CTSE MAb Mouse Cathepsin E / CTSE 兔單抗 ELISA
KLK8 MAb Human KLK8 / Kallikrein 8 兔單抗 ELISA
F11 MAb Human Coagulation Factor XI / F11 兔單抗 ELISA
CHI3L1 MAb Human CHI3L1 / YKL40 兔單抗 ELISA
CFD MAb Human Adipsin / Complement Factor D / CFD 兔單抗 ELISA
CD48 MAb Mouse CD48 / SLAMF2 兔單抗 (PE) FCM
SELL MAb Mouse CD62L / L-Selectin / SELL 兔單抗 (PE) FCM
