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上海莼試生物技術有限公司

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人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1
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更新時間:2017-06-01 08:16:18瀏覽次數(shù):303

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【簡單介紹】
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1,售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細胞供應商,提供人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱     人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1        
形態(tài)特性      上皮細胞樣        
生長特性     貼壁生長         
特征特性      取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織,中國醫(yī)學基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心建立。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  20%FBS         
傳代方法      1:3傳代;3~4天1次。        
傳代情況     P6        
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測     培養(yǎng)法(-)         
STR      Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D6S1043:12,18;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20,;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;Penta E:14,16;vWA:16;         
同工酶             
染色體      46,XY        
使用權限     A類    
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

PVR     MAb    Rat    CD155 / PVR Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
ALCAM     MAb    Mouse    CD166 / ALCAM Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
HAVCR1     MAb    Human    KIM-1 / TIM1 / HACVR1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
CTNNB1     MAb    Human    beta-Catenin / CTNNB1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
MS4A1     MAb    Ferret    Ferret CD20 / MS4A1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
IL2RA     MAb    Mouse    CD25 / IL2RA Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
F2     MAb    Mouse    Coagulation Factor II / F2 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
ERBB3     MAb    Mouse    HER3 / ErbB3 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
KIT     MAb    Human    c-Kit / CD117 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
CD63     MAb    Human    CD63 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
ASGR1     MAb    Human    ASGPR1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
ACVRL1     MAb    Human    ALK-1 / ACVRL1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
ULBP2     MAb    Human    ULBP2 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
SUMO1     MAb    Human    SUMO1 / SUMO-1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
LUM     MAb    Human    Lumican / LUM Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
CSF2     MAb    Human    GM-CSF / CSF2 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
C6     MAb    Human    C6 / Complement component 6 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
AKR1B1     MAb    Human    AKR1B1 Antibody, Rabbit MAb     ELISA   
CEACAM1     MAb    Human    CEACAM1 / CD66a Antibody, Rabbit MAb     FCM   
S100A7     MAb    Human    S100A7 兔單抗 (PE)     FCM   
HSPB1     MAb    Human    HSP27 / HSPB1 兔單抗 (PE)     FCM   
SOD1     MAb    Human    SOD1 兔單抗 (PE)     FCM   
EPHB4     MAb    Human    EphB4 兔單抗 (PE)     FCM   
SERPINF2     MAb    Human    SerpinF2 兔單抗 (PE)     FCM   
CDH2     MAb    Human    N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE)     FCM   
CDH2     MAb    Human    N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE)     FCM   
CLEC7A     MAb    Mouse    Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE)     FCM   
CD48     MAb    Mouse    CD48 / SLAMF2 兔單抗 (APC)     FCM   
TFRC     MAb    Human    Transferrin Receptor / TFRC / CD71 兔單抗 (PE)     FCM   

 



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