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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格，ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間：2017-06-01 08:46:11瀏覽次數(shù)：302
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供恒河猴腎細(xì)胞；RM-3的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細(xì)胞名稱 恒河猴腎細(xì)胞；RM-3
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性獼猴的皮膚組織。2004年由昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
CD34 cDNA Human 人 CD34 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
PXN cDNA Human 人 paxillin 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)
GP120 cDNA HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, CRF07_BC) GP120 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
IFNA2 cDNA Human 人 IFNA2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
IFNA2 cDNA Human 人 IFNA2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
TNFSF11 cDNA Human 人 TNFSF11 / CD254 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
CSF2 cDNA Human 人 GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FGF2 cDNA Human 人 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
FGF1 cDNA Human 人 aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
FGF1 cDNA Human 人 aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
CEACAM5 cDNA Human 人 CD66e / CEACAM5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
EGFR cDNA Canine 狗 EGFR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
GSTA1 cDNA Human 人 GSTA1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
BRAF cDNA Human 人 BRAF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
EPCAM cDNA Human 人 EpCAM / TROP1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體)(密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽
PDCD1 cDNA Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
TXN2 cDNA Human 人 TXN2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TXN cDNA Human 人 TXN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IDO1 cDNA Human 人 IDO1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
KLB cDNA Human 人 Klotho beta 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CCR5 cDNA Human 人 CCR5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MCRS1 cDNA Human 人 MCRS1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
