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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:28:54瀏覽次數(shù):592
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細(xì)胞名稱 牛腎細(xì)胞;MDBK
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性成年牛的腎組織。由Madin SH和Darby NB于1957年2月建立??捎糜诙繖z測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
牛腎細(xì)胞;MDBK實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
LGMN cDNA Mouse 小鼠 LGMN / AEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LXN cDNA Mouse 小鼠 LXN / Latexin 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ITGA4 cDNA Mouse 小鼠 Integrinalpha4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL20 cDNA Mouse 小鼠 CCL20 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL19 cDNA Mouse 小鼠 CCL19 / MIP-3b 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL17 cDNA Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SELL cDNA Mouse 小鼠 CD62L / SELL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ADAM9 cDNA Mouse 小鼠 ADAM9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GHR cDNA Mouse 小鼠 GHR 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SPINT2 cDNA Mouse 小鼠 SPINT2 / HAI-2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IGFBP1 cDNA Mouse 小鼠 IGFBP-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IGF2 cDNA Mouse 小鼠 IGF-II 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HGFA cDNA Mouse 小鼠 Hgfac 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HGF cDNA Mouse 小鼠 HGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF2 cDNA Mouse 小鼠 bFGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR4 cDNA Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGFR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
F7 cDNA Mouse 小鼠 FVII / F7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SFRP1 cDNA Mouse 小鼠 sFRP-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FZD2 cDNA Mouse 小鼠 Frizzled-2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EPOR cDNA Mouse 小鼠 EPOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR2 cDNA Mouse 小鼠 FCGR2 / CD32 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FSTL3 cDNA Mouse 小鼠 Fstl3 / FLRG 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SFRP2 cDNA Mouse 小鼠 sFRP-2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FAS cDNA Mouse 小鼠 CD95 / Fas 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL6 cDNA Mouse 小鼠 CCL6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL12 cDNA Mouse 小鼠 CXCL12 / SDF1b 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RARRES2 cDNA Mouse 小鼠 Rarres2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD14 cDNA Mouse 小鼠 CD14 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL5 cDNA Mouse 小鼠 CCL5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL12 cDNA Mouse 小鼠 CCL12 / MCP-5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD5L cDNA Mouse 小鼠 CD5L 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXADR cDNA Mouse 小鼠 CXADR 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ARSA cDNA Mouse 小鼠 ARSA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VTCN1 cDNA Mouse 小鼠 B7-H4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GREM1 cDNA Mouse 小鼠 GREM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTSL1 cDNA Mouse 小鼠 CTSL / CTSL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CA12 cDNA Mouse 小鼠 CAXII 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CA14 cDNA Mouse 小鼠 CAXIV 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BCL2L1 cDNA Mouse 小鼠 BCL2L1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BCL2A1 cDNA Mouse 小鼠 BCL2A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD274 cDNA Mouse 小鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MAPK8 cDNA Mouse 小鼠 MAPK8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACY1 cDNA Mouse 小鼠 ACY1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTSC cDNA Mouse 小鼠 CTSC / DPPI 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ASAH2 cDNA Mouse 小鼠 ASAH2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALCAM cDNA Mouse 小鼠 CD166 / ALCAM 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMPR1B cDNA Mouse 小鼠 ALK-6 / BMPR-IB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ANGPTL3 cDNA Mouse 小鼠 Angiopoietin-like3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BACE1 cDNA Mouse 小鼠 BACE1 / ASP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆