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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
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更新時(shí)間:2017-06-06 10:09:54瀏覽次數(shù):392

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【簡(jiǎn)單介紹】
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN  
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣   
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS  
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次  
傳代情況  C8  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測(cè)  陰性   
STR    
同工酶    
染色體    

使用權(quán)限  未定 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。


操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
2)含量:>5x105 個(gè)/mL  
肝kuffer細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
肝kuffer細(xì)胞位于肝血竇腔內(nèi),具有變形運(yùn)動(dòng)和活躍的吞噬功能,還具有處理和傳遞抗原、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答等作用,屬單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)主要成員。是清除細(xì)菌及其毒素從而拮抗感染的重要防御細(xì)胞,同時(shí)也通過(guò)釋放各種炎癥介質(zhì),在內(nèi)毒素性肝損傷的發(fā)生中發(fā)揮主導(dǎo)作用 。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肝組織。  
2)細(xì)胞鑒定:巨噬細(xì)胞標(biāo)志物(F4/80)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:圓形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
角膜基質(zhì)細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不同,部zui薄。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。  
角膜基質(zhì)為中層結(jié)締組織,*透明,角膜基質(zhì)層中的主要細(xì)胞成分是角膜基質(zhì)細(xì)胞,它能合成和分泌纖維,并且對(duì)膠原束的排列和平衡都起作用。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。  
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,并分泌多種生長(zhǎng)子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。  
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
晶狀體上皮細(xì)胞  

細(xì)胞詳述  
哺乳動(dòng)物的晶狀體主要由兩種細(xì)胞組成:形成主體的晶狀體纖維細(xì)胞和一層覆蓋在晶狀體前表面的單層上皮細(xì)胞。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過(guò)程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長(zhǎng)而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并zui終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長(zhǎng)子的調(diào)控,包括表皮生長(zhǎng)子和胰島素等。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。  
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
結(jié)膜成纖維細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
結(jié)膜松弛癥(conjunctiochalasis,CCh)是由于球結(jié)膜過(guò)度松弛和(或)下瞼緣張力高,造成松弛球結(jié)膜堆積在眼球與下瞼緣、內(nèi)外眥部之間,形成皺褶,引起眼表淚液分布異常,并伴有眼部不適如流淚、干澀、異物感等癥狀的眼病。有研究表明結(jié)膜松弛癥中結(jié)膜成纖維細(xì)胞的改變,影響細(xì)胞外基質(zhì)成分的平衡狀態(tài)和穩(wěn)定性,可能是結(jié)膜松弛癥發(fā)生的原。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的眼球。  
2)細(xì)胞鑒定:結(jié)蛋白(Desmin)或波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
結(jié)膜上皮細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
結(jié)膜上皮是眼表的重要組成部分,是眼表的保護(hù)屏障,在維持淚膜的穩(wěn)定性、潤(rùn)滑眼表、維持正常視力和眼表上皮損傷修復(fù)中發(fā)揮重要作用。上世紀(jì)90 年代,隨著人們對(duì)眼表的深入研究,提出了結(jié)膜上皮干細(xì)胞的概念,認(rèn)為結(jié)膜上皮細(xì)胞的自我更新來(lái)自結(jié)膜上皮干細(xì)胞。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的眼球。  
2)細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:扁平的橢圓形、梭形或不規(guī)則形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞  
 



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