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上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià) |
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更新時(shí)間:2017-06-08 11:42:08瀏覽次數(shù):292
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1 的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1
形態(tài)特性 淋巴細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 EB轉(zhuǎn)染B細(xì)胞
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
儲(chǔ)存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:親和素樹脂
英文名字:Immobilized Aidin Resin
特點(diǎn):
Aidin coalently coupled to ~6% cross linked agarose. Minimal Leaching.Binding capacity 15~20 μg biotin/ml resin. For immunoprecipitation with biotinylated antibodies. Pull down assays with biotinylated proteins. Purification of biotinylated molecules, including:proteins, antibodies, DNA, carbohydrates.
說明:
Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1 ). Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS Page Sample Loading Buffer. Aidin is a glycoprotein with approximay 10% of its total mass coming from carbohydrates. Aidin has a molecular weight of 67 kDa and contains four identical 128 amino acid subunits that each has a single biotin binding domain. Aidin is a basic protein with an isoelectric pH of 10~10.5 and is readily soluble in aqueous buffers containing a wide range of salt, pH (2~11), temperature and other laboratory agents. This wide range of tolerance makes aidin suitable for a wide ariety of analytical applications. Aidin has extraordinary binding affinity for biotin (Ka=1015 M-1). The aidin in coalently coupled to the agarose resulting in minimal leaching and is stable oer pH2~11. The Aidin Resin is designed for the single step small and large scale affinity purification of proteins and antibodies with a biotin tag. The resin can also be used for immunoprecipitations using biotin labeled antibodies. Supplied as a 50% resin slurry.
用途及描述:科研試劑,蛋白純化與層析
儲(chǔ)存條件: 2~8°C
中文名稱:咪唑
英文名字:Imidazole
分子式:C3H4N2 分子量:68.08
物理性狀及指標(biāo):
水分:……………………≤0.2%
熔點(diǎn):……………………87~91℃
灼燒殘?jiān)?hellip;……………≤0.1%
含量:……………………≥99%
用途及描述:科研試劑,適用于 pH 6.2-7.8 范圍內(nèi)的液體。
儲(chǔ)存條件:18~25℃,避光防潮密閉干燥。
類別:免疫組化
中文名稱:0.1%液消化液
英文名字:0.1% Trypsin Solution
產(chǎn)品描述
抗原修復(fù)用于甲醛固定的石蠟包埋組織切片。石蠟切片標(biāo)本用甲醛固定,使得細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進(jìn)行免疫組化染色時(shí),需要行抗原修復(fù)或暴露,即將固定時(shí)分子之間所 形成的交聯(lián)破壞,而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。 酶消化方法是常用的抗原修復(fù)方法之一,常用 0.1%和 0.4%液。一般 說來,消化能力較弱,主要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的消化,主要用于細(xì) 胞間抗原的消化。工作中要認(rèn)真參照抗體說明書指示進(jìn)行消化酶的選擇,這樣針對(duì)性更強(qiáng),標(biāo)記效果更理想。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
主要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的消化,本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點(diǎn)。
儲(chǔ)存條件
-20℃
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
中文名稱:AP標(biāo)記抗體稀釋液
英文名字:AP標(biāo)記抗體稀釋液
產(chǎn)品說明:
AP標(biāo)記抗體稀釋液(AP-Antibody Dilution Buffer)適用于免疫組織化學(xué)與免疫印跡等實(shí)驗(yàn)中AP標(biāo)記抗體的稀釋。稀釋液中添加了抗體保護(hù)劑和穩(wěn)定劑等成分,有效增加了稀釋后AP標(biāo)記抗體的穩(wěn)定性。用此稀釋液稀釋后的AP標(biāo)記抗體可在2-8℃穩(wěn)定保存至少六個(gè)月。
使用方法:
按照一抗效價(jià)(或個(gè)人優(yōu)化條件),將適量抗體加入抗體稀釋液中即可。例如,效價(jià)為1:1000時(shí),可將1ul抗體加入到1ml抗體稀釋液中,充分混勻后即可使用??贵w現(xiàn)用現(xiàn)稀釋,稀釋后的抗體可2-8℃保存。