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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞；Trex-293的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細(xì)胞名稱  人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞；Trex-293  
形態(tài)特性   上皮樣；多角　  
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細(xì)胞在293細(xì)胞的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改造，在含有滅瘟素的培養(yǎng)基中穩(wěn)定表達(dá)四環(huán)素阻遏，且重組腺病毒產(chǎn)率高于其他細(xì)胞的產(chǎn)率。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS + Blasticidin  
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代  
傳代情況  PN5  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
注意事項：  
1.本產(chǎn)品含有較高濃度甘油，常規(guī)-20℃保存為液體狀態(tài)，可直接使用。若冰箱溫度不穩(wěn)，導(dǎo)致結(jié)冰，可適當(dāng)分裝后置于4℃保存，至少穩(wěn)定6個月。  
2.Marker分離效果與PAGE膠濃度相關(guān)，若分離膠濃度低于15%，25kD以下條帶不易分離，但不影響綠色（25KD）及以上條帶。如果目的條帶小于25KD，建議分離膠濃度大于或等于15%。  
3.轉(zhuǎn)膜效果與轉(zhuǎn)膜時間有關(guān)，需根據(jù)客戶目的條帶大小而定，如果轉(zhuǎn)膜后較大分子量條帶有部分未轉(zhuǎn)膜成功，屬于正?，F(xiàn)象。  
儲存條件：  
-20℃保存，有效期至少2年。  
中文名稱：藍(lán)色預(yù)染低分子量蛋白Marker(14.4-97.4kDa)  
英文名字：Blue Prestained Protein Ladder  
產(chǎn)品簡介：  
本產(chǎn)品包含6種預(yù)染的已知分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)，分子量范圍為14.4kD-97.4kD，條帶分別為：14.4，20.1，31，43，66.2，97.4，可以直接觀察蛋白質(zhì)電泳及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)移效果。SDS-PAGE凝膠電泳后轉(zhuǎn)移到PDF或NC膜上可得到清晰的6條藍(lán)色的蛋。  
使用說明：  
1.開封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。  
3.建議分離膠濃度為10-12%。  
注意事項：  
上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
儲存條件：  
避免反復(fù)凍融，建議分裝后于-20℃保存。  
中文名稱：非預(yù)染中分子量蛋白Marker(43-200kDa)  
英文名字：Middle Molecular Weight Protein Marker  
產(chǎn)品簡介：  
本產(chǎn)品包含5種蛋白質(zhì)混合物，分子量范圍為43kD-200kD，條帶分別為：43，66.2，97.4，130，220。過SDS-PAGE電泳，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶?？梢杂脕砼袛郤DS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。  
使用說明：  
1.開封后，可根據(jù)需要分裝成小管，建議每管分裝10μl，-20℃貯存，每次取一管使用。  
2.本產(chǎn)品已含有了上樣緩沖液，使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳，上樣量5-10μl。  
3.建議分離膠濃度為8%。  
注意事項：上樣前，蛋白樣品65℃預(yù)熱是必需的，否則電泳后一些蛋白會沉積在分離膠的上沿，出現(xiàn)一條蛋白雜帶。  
儲存條件：  
-20℃可保存至少六個月。避免反復(fù)凍融，建議分裝后于-20℃保存。  
中文名稱：非預(yù)染蛋白marKer  
英文名字：Unstained Protein Ladder(Middle RanGe)  
概述  
本產(chǎn)品為7種蛋白的混合(14.4~116kDa)，適用于SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis）和免疫印跡（Western blot）中蛋白含量的檢測。  
使用說明  
上樣5ul: 0.75mm厚度迷你膠板  
上樣10ul:1.5mm厚度迷你膠板; 0.75mm厚度大膠板  
上樣20ul:1.5mm厚度大膠板  
技術(shù)規(guī)格  
條帶為4.4, 18.4, 25, 35, 45, 66.2, 116 kDa.  
中文名稱：Western blot蛋白Marker  
英文名字：Western blot Protein Ladder  
產(chǎn)品簡介：  
Western Blot Marker是專門為Western Blot試驗設(shè)計的分子量標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)的Western Blot試驗需要使用預(yù)染蛋白Marker來跟蹤檢測陽性抗原信號和轉(zhuǎn)膜效率。但預(yù)染蛋白Marker用在Western Blot試驗中有三大缺點：（1）預(yù)染蛋白Marker無法在膠片上曝光，曝光信號需要根據(jù)膜上的預(yù)染蛋白Marker來判斷，此后續(xù)的圖片需要拼接才能兩者合而為一；（2）預(yù)染蛋白Marker都過化學(xué)修飾，過化學(xué)修飾的蛋白在SDS-PAGE電泳過程中遷移率發(fā)生改變，分子量信息不再準(zhǔn)確，往往導(dǎo)致Western Blot結(jié)果判斷出現(xiàn)較大偏差；（3）預(yù)染蛋白Marker無法檢測作為雜交過程的陽性對照。Western Blot Marker由6種不同分子量的蛋白組成（20、40、60、70、80、120 KDa），其中70KDa條帶為藍(lán)色預(yù)染marker，其它五個條帶都可與人、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、兔的IgG恒定區(qū)結(jié)合。Western Blot Marker可以直接結(jié)合二抗，或通過結(jié)合一抗間接結(jié)合二抗，此蛋白Marker就能與抗原在同一張膠片上曝出信號，陽性信號可以直接通過Western Blot Marker的位置來判斷。Western Blot Marker不過任何化學(xué)修飾，分子量精確。  
中文名稱：GE高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)(GE17-0445-01)  
英文名字：GE HMW Natie Marker Kit  
描述及應(yīng)用：  
通過和標(biāo)準(zhǔn)樣品對比，用PAGE膠檢測未知樣品蛋白含量。