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操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

我司提供免費代測服務(wù)，凡購買我司試劑盒的用戶，只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度，雙方協(xié)定實驗周期，保質(zhì)保量完成委托實驗，并將實驗結(jié)果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。

從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

實驗室注意事項：

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務(wù)必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。

實驗標(biāo)準(zhǔn)品圖：

40 ng/L，5號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20 ng/L，4號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10 ng/L，3號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

5 ng/L，2號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.5 ng/L，1號標(biāo)準(zhǔn)品，150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

標(biāo)本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實驗室可選用機器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，已獲得國家承認(rèn)的“三證"，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；

補體的控制方法：

①用EDTA稀釋標(biāo)本；

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；

2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時間過長或凝固不全等；

控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本；對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

聚乙二單甲 平均分子量500鋁 CPAnti-Cyr61/FITC  熒光素標(biāo)記富半胱肝素結(jié)合蛋白61IgG

1-壬烯 90%鋁 SP,powderAnti-Cytochrome C/FITC  熒光素標(biāo)記色素 C抗體IgG

萘 閃爍純，99%鋁粉 99.9% metals basis,200-300目Anti-Cytochrome P450 2C19/CYP2C19 /FITC  熒光素標(biāo)記色素P450 2C19抗體IgG

萘 AR鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3Anti-Cytochrome P450 2C9/CYP2C9 /FITC  熒光素標(biāo)記色素P450 2C9抗體IgG

正辛烷 96%鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL，基體:5%HClAnti-Cytochrome P450 2D6/CYP2D6 /FITC  熒光素標(biāo)記色素P450 2D6抗體IgG

正辛烷 CP,95%鋁 99.95%，1-2 μm，球形Anti-CK1/8/19(Cytokeratin 1/8/19)/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白抗體1/8/19IgG

1-辛硫 98%納米鋁粉 99.9% metals basis:,粒徑：50nmAnti-DRD1 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記多巴受體-D1抗體IgG

1-辛烯 98%水質(zhì)鋁標(biāo)樣 analytical standard,0.286mg/l,in water  u=0.031%Anti-DRD2 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記多巴受體-D2抗體IgG

ANKRD1心肌錨蛋白重復(fù)域1酶聯(lián)免疫試劑盒常春藤皂苷元 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)免疫試劑盒無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵因6抗體p150 CAF1  染色質(zhì)組裝因子1P155抗體

 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒朊蛋白DPL抗體P14ARF/CDKN2A  抑癌因p16抗體

哈巴俄甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人Podocin 免疫試劑盒肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激抗體P14ARF  抑癌因p14抗體

大麥芽堿  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成(PL7)免疫試劑盒有絲分裂控制蛋白dis3抗體p107/RBL1  視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體

豆腐果甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人PL12抗體/抗氨酰tRNA合成(PL12/AlaRS)免疫試劑盒肝癌新因3蛋白抗體Oxytocin R  催產(chǎn)素受體(受體)抗體

異歐前胡素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)免疫試劑盒Dapper2蛋白抗體Oxytetracycline 抗體

鹽藥根堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人P53抗體免疫試劑盒Dapper3蛋白抗體OXSR1  氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體

黨參炔苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人P2蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒背神經(jīng)管核蛋白抗體ox-LDL  氧化低密度脂蛋白抗體

甘草素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人P2蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒雙精氨水解1抗體ox-LDL  氧化低密度脂蛋白抗體

蒿本內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥90%人P27蛋白(P27)免疫試劑盒絲氨/蘇氨蛋白激DCAMKL1抗體OXCT1  含氧輔A轉(zhuǎn)移1抗體

內(nèi)脂 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人P0蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒唐氏綜合征粘附分子抗體OVCA2  卵巢癌相關(guān)因2蛋白抗體

鹽川芎 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%（HPLC)人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒脂HTPAP抗體OVCA1  卵巢癌相關(guān)因1抗體

α-倒捻子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)免疫試劑盒穿膜蛋白DLK1抗體（C端）OVA/SerpinB8  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體

羅漢果苷V  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%人N-乙酰-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫試劑盒二氫葉還原樣1抗體OTUB1  泛素特異性蛋白OTB1抗體

（-）-薄荷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5%人N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒脫氧尿苷三DUT抗體OTUB  泛素特異性蛋白Otubain2抗體