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公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細(xì)胞的訂購信息：

英文簡稱：Huh-1細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：

生長特性：

特征特性：

培養(yǎng)條件：

傳代方法：

貨號：CS-X64053
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

注意事項：
（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞在對數(shù)生，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室，使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)檢測試劑盒英文名稱：PLUNC ELISA Kit19號染色體開放閱讀框80抗體包裝100g

多效生長因子(PTN)檢測試劑盒英文名稱：PTN ELISA Kit半雙加氧酶1抗體包裝25g

多配體蛋白聚糖1(SDC1)檢測試劑盒英文名稱：SDC1 ELISA Kit膠原蛋白11A2抗體包裝5g

多聚球蛋白受體(PIGR)檢測試劑盒英文名稱：PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗體包裝1g

多聚蛋白2(MMRN2)檢測試劑盒英文名稱：MMRN2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝5g

多功能肽酶2(LMP2)檢測試劑盒英文名稱：LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗體包裝25g

多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒英文名稱：VS ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)釋放結(jié)合蛋白抗體包裝5g

多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)檢測試劑盒英文名稱：DAT ELISA Kit3號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g

多巴胺受體D4(DRD4)檢測試劑盒英文名稱：DRD4 ELISA Kit瓜氨酸環(huán)肽抗體包裝25g

多巴胺受體D3(DRD3)檢測試劑盒英文名稱：DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗體包裝5g

多巴胺受體D1(DRD1)檢測試劑盒英文名稱：DRD1 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體包裝1g

多胺氧化酶(PAOX)檢測試劑盒英文名稱：PAOX ELISA Kit磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體包裝25g

對氧磷酶2(PON2)檢測試劑盒英文名稱：PON2 ELISA Kit膠原蛋白4a2亞基抗體包裝5g

對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒英文名稱：PON1 ELISA KitCD161c抗體包裝100g

端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒英文名稱：TEP1 ELISA Kit補體C1r鏈多肽抗體包裝25g
Huh-1細(xì)胞西尼地平英文名稱： Ketanserin Tartrate脊索生成素樣蛋白1抗體包裝5g

英文名稱： Ketoconazole神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill抗體包裝25g

英文名稱： Ketoconazole二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

英文名稱： Kitasamycin轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體包裝1g

鹽酸酮英文名稱： Latanoprost神經(jīng)網(wǎng)蛋白CopineVI抗體包裝5g

鹽酸巴尼地平英文名稱： Lenalidomide腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1C抗體包裝1g

/苯那普利英文名稱： Lenalidomide補體因子B抗體包裝25g

鹽酸貝尼地平英文名稱： Letrozole乙酰受體前體蛋白AChRα1抗體包裝5g

卓英文名稱： Letrozole豬瘟病包膜糖蛋白E2抗體包裝100g

鹽酸丁咯地爾英文名稱： Leuprorelin Acetate （Leuprolide Acetate）冷休克結(jié)構(gòu)域蛋白C2抗體包裝25g

鹽酸多巴酚丁英文名稱： Levetiracetam碳酸酐酶10抗體包裝500g

鹽酸桂利英文名稱： LevetiracetamL選擇素抗體包裝100g

鹽酸決奈達(dá)隆英文名稱： Lincomycin HCl致癌基因C-Myc抗體包裝25g

鹽酸喹那普利英文名稱： Lincomycin HCl膽囊收縮素8抗體包裝500g

英文名稱： Liothyronine sodium上皮鈣粘附分子抗體包裝5MG
實驗報告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大小；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。