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實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
參數(shù)規(guī)格：
產品名稱：植物內源基因tRNA-LeuPCR檢測試劑盒
產品貨號：CP100017
產品規(guī)格：50T
產品分類：熒光-PCR法
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
嗜芽孢桿菌趨化素樣因子超家族成員2抗體Human DDX3(DEAD box protein 3, X-chromosomal) ELISA Kit兔(ADR)免疫試劑盒

白色茶樹菇胱硫γ裂解酶抗體Human ECM2 ELISA Kit兔γ-谷氨酰轉移酶1(GGT1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌囊性纖維化跨膜轉運調節(jié)因子抗體Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA Kit兔β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒

猴頭菌—50043酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體Human E2F4 ELISA Kit兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒

米羅布里格小單孢菌CD40L抗體Human E2F7 ELISA Kit兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒

米曲霉α-s1酪蛋白抗體Human EDAR ELISA Kit兔P物質受體(SP-R)免疫試劑盒

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大腸埃希菌高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體Human EDC4 ELISA Kit兔p53(p53)免疫試劑盒

西西布哈加瓦氏菌信號轉導蛋白亞基7A抗體Human CXCL17 ELISA Kit兔N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒

棒狀桿菌ATCC13032凋亡抑制因子抗體Human DEFB121 ELISA Kit兔NADPH氧化酶1(NOX1)免疫試劑盒

米根霉D型產氣莢膜梭菌抗體Human DNAJB11 ELISA Kit兔C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

慢生根瘤菌降鈣素抗體Human CTRP6 ELISA Kit兔CD8分子(CD8)免疫試劑盒

變異短波單胞菌20號染色體開放閱讀框14抗體Human DNAJB4 ELISA Kit兔CD4分子(CD4)免疫試劑盒

多粘芽孢桿菌結締組織生長因子抗體Human Cyclin T1 ELISA Kit兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌性T抗原-4抗體Human DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) ELISA Kit兔ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1型13(ADAMTS13)免疫試劑盒

黑曲霉降鈣素受體抗體Human CYGB(Cytoglobin) ELISA Kit兔8-異構前列腺素(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒
植物內源基因tRNA-LeuPCR檢測試劑盒棒桿菌Corynebacterium glutamicum 質量規(guī)格：含量測定抗小鼠抗體試劑盒古倫賓;Columbin

水生芽孢桿菌Bacillus│aquatilis 質量規(guī)格：>98.5%,BR抗小腦試劑盒告達亭苷元;caudatin

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品抗小核糖核蛋白/Sm試劑盒果糖;beta-D-Fructopyra

蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：≥97%,BR抗線粒體抗體M2亞型試劑盒;Diammonium gly

弗氏鏈霉菌Streptomyces│fradiae 質量規(guī)格：>99%,AR抗線粒體抗體試劑盒甘露;Mannitol

青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品抗紋狀體試劑盒;Glycine

嗜熱鐵質菌Ferroplasma│thermophilium 質量規(guī)格：>99%,USP32,BR抗胃壁抗體試劑盒L-;L-Glutamic aci

毛霉Mucor│sp. 質量規(guī)格：含量測定抗尾狀核試劑盒格列風內酯;Griffonilide

刺孢小克銀漢霉原變種Cunninghamella│echinulata var. echinulata 質量規(guī)格：>98%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)抗網(wǎng)硬蛋白抗體試劑盒廣防風苷A;Epimeredinosid