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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
公司產(chǎn)品僅用于科研以下是細(xì)胞的訂購(gòu)信息：

英文簡(jiǎn)稱：MM.1S細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱：免疫球蛋白lambda骨髓瘤細(xì)胞

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：混合生長(zhǎng)

特征特性：該細(xì)胞源于患有多發(fā)性骨髓瘤的黑人女性患者， CD25+, CD38+, CD52+, CD59+，表達(dá)糖皮質(zhì)激素受體（GR），分泌IgGλ輕鏈，對(duì)敏感。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法： 1:2~1:4傳代，2-3天換液1次。

貨號(hào)：CS-X63904

注意事項(xiàng)：
（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞在對(duì)數(shù)生，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌消化過(guò)度，吹打不可太用力，不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、產(chǎn)分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希菌拉丁屬名: Paenibacillus jilunlii

李季倫氏類芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

果生鏈核盤菌拉丁屬名: Citrobacter farmeri

法氏檸檬桿菌用途: 與大翼豆共生固氮

豇豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Fusarium proliferatum var. proliferatum

層出鐮孢原變種用途: 藥用植物內(nèi)生菌

白地霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

多主葡萄殼菌拉丁屬名: Escherichia coli

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

植物乳桿菌植物亞種用途: 松毛蟲等鱗翅目害蟲防治

蘇云金桿菌武漢亞種拉丁屬名: Naganishia adeliensis

阿德利長(zhǎng)西氏酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

耐放射異常球菌用途: 表達(dá)甘露聚糖酶，應(yīng)用于飼料工業(yè)

畢赤酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

茶新菇用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性

鏈霉菌拉丁屬名: Polaromonas  vacuolata
MM.1S細(xì)胞小豆蔻明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Jolkinolide B乙酰基轉(zhuǎn)移酶10抗體包裝1g

小茴香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Liquidambaric lactone/蛋白激酶Nek7抗體包裝25g

小薊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycerine trioleate神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g

小秦艽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vinblastine煙酰核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體包裝100g

小葉榕（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vinblastine利鈉肽受體B抗體包裝25g

纈草三酯英文名稱： Anhydrovinblastine利鈉肽受體C抗體包裝100g

薤白（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vincristine磷酸化受體2B抗體包裝25g

辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sparteine sulfate磷酸化受體2B抗體包裝100ml

辛弗林鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： LappaconitineNADPH氧化酶2抗體包裝25ml

辛辣內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： LycopeneNADPH氧化酶活化蛋白1抗體包裝100g

辛夷（望春花）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Orcinol glucosid磷酸化核因子抗體包裝25g

辛夷脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Liriope muscari baily saponins C磷酸化核因子抗體包裝1g

新補(bǔ)骨脂異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ardisiacrispin A磷酸化核因子抗體包裝5g

新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Pectolinarigenin磷酸化核因子抗體包裝1g

新二氫查爾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Polygalasaponin F神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1抗體包裝25g