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原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠外周血單個(gè)核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?，因此得以分離出不同的細(xì)胞。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human maix metalloproteinase 11 (MMP11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒

RabbitOncostatin-M,OSMELISAKit 兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAi-GAD谷脫羧酶抗體(間接法二步法)規(guī)格：48T/96T

血液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬血清(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬血清淀粉樣蛋白A（SAA）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 ，英文名： Orexin A ELISA Kit

Rabbit macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1sRII(Humansolubleierleukin-1receptorII)ELISAkit人白介素1可溶性受體Ⅱ規(guī)格：48T/96T

通用型空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni)試劑盒20次

ELISAKitTXB2大鼠血栓素B2規(guī)格：48T/96T

VCAM1重組小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜多肽抗原

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein

BID Protein Human 重組人 BID 蛋白

JAM2 Protein Rat 重組大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜多肽抗原

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JAM2 Protein Rat 重組大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

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