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本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠胰腺星狀分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細(xì)胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達(dá)Desmin蛋白，活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽(yáng)性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽(yáng)性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見(jiàn)明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示，細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin，48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)和傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA，而不再表達(dá)Desmin，說(shuō)明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動(dòng)了激活過(guò)程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活，傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時(shí)，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforApo-H(HumanApolipoproteinH)ELISAKit人載脂蛋白H規(guī)格：48T/96T

溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)1毫升

Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit豬髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織因子   英文名稱：    tissue factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TF

組織因子抑制物   英文名稱：    tissue factor protein inhibitor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TFPⅠ

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-α   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGF-α

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor β1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGF-β1

大鼠Ras相關(guān)C3底物1(RAC1)ELISA試劑盒 ，英文名： RAC1 ELISA Kit

Rabbit growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIFNAlpha-Ab(HumanIerferonAlphaAibody)ELISAKit人抗α干擾素抗體規(guī)格：48T/96T

通用型禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病(ReticuloendotheliosisVirus;REV)試劑盒20次

ELISAKitVA大鼠A規(guī)格：48T/96T

LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DCC (Deleted in colorectal cancer gene 0.5mgDCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原

MAD2L1重組人 MAD2L1 / MAD2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C6 Protein Human 重組人 C6 / complement component 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL18R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠胰腺星狀細(xì)胞DCC (Deleted in colorectal cancer gene 0.5mgDCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原

C6 Protein Human 重組人 C6 / complement component 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL18R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MAD2L1重組人 MAD2L1 / MAD2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein