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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

人腦靜脈血管平滑肌分離自腦靜脈組織；與腦動(dòng)脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈；小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢，進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮，最后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢，即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦靜脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)ELISA試劑盒 96T/48T

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶規(guī)格：48T/96T

飲料比色法定量檢測試劑盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒   小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒   小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠致癌基因相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠致癌基因相關(guān)蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠脂聯(lián)素elisa試劑盒   小鼠脂聯(lián)素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脂聯(lián)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂聯(lián)素試劑盒、小鼠脂聯(lián)素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠脂蛋白elisa試劑盒   小鼠脂蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脂蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂蛋白試劑盒、小鼠脂蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒 ，英文名： DA ELISA Kit

Porcine heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

馬特定基因序列(Hor)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTC4(MouseLeukoieneC4)ELISAKit小鼠白三烯C4規(guī)格：48T/96T

體液總巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitADM雞腎上腺髓質(zhì)素規(guī)格：48T/96T

CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原

RHOA重組人 RhoA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原

CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

RHOA重組人 RhoA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。