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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞，此類細(xì)胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞器消失，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用，故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦，使其過(guò)早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過(guò)程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質(zhì)層下方還可見(jiàn)到透明層。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒

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HumaeceptorⅠfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅠELISAKitGFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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大鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGES2 ELISA Kit

Mouse angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGR-Beta(Humanglucocoicoidreceptor-Beta)ELISAKit人糖皮質(zhì)激素受體β規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

REG1A重組食蟹猴 REG1A / PSPS 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mglamin A 核纖層蛋白A抗原

SELL重組人 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IgG2b Protein Mouse 重組小鼠 IgG2b-Fc 蛋白

兔表皮角質(zhì)形成細(xì)胞白介素17(IL17)重組蛋白 Recombinant Interleukin 17 (IL17)

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BCL2L1重組小鼠 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (aa 1-212, His 標(biāo)簽) Protein

PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GOT1重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。