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上海莼試生物技術有限公司
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| 參考價 | ￥1-￥5800 | /件 |
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型號
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品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
更新時間：2024-10-03 14:53:10瀏覽次數(shù)：59
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商品屬性：
組織來源 | 腸 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3767 | 生長特性 | 懸浮 |
細胞簡介：
兔腸神經(jīng)嵴干分離自腸組織；神經(jīng)嵴干細胞（neural crest stem cells，NCSC），即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細胞，起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè)，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞在形態(tài)學上有著顯著不同，NCSC可表達低親和力神經(jīng)營養(yǎng)因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質(zhì)細胞，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織，如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細胞、內(nèi)分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的NCSC，被稱為腸神經(jīng)嵴干細胞（gut neural crest stem cells，GNCSC）。
方法簡介：
實驗室分離的兔腸神經(jīng)嵴干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔腸神經(jīng)嵴干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳1-3代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞VS細胞系：
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：
1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。
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