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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

兔肺動脈成纖維細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔肺動脈成纖維分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質(zhì)；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肺動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔肺動脈成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

cit瓜規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠髓過氧化物酶   英文名稱：   Mouse Myeloperoxidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MPO

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-1   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MCP-1

小鼠巨噬細胞趨化蛋白-3   英文名稱：   monocyte chemotactic protein 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MCP-3

小鼠M-能受體結(jié)合力   英文名稱：   M—cholinoceptor binding capacity   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MCBC

小鼠神經(jīng)生長導向因子(Slit2) ELISA 試劑盒

Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒

HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

GoatBeta-Endorphin,β-EPELISA試劑盒山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母黑色素含量比色法定量檢測試劑盒20次

MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源)

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白

CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白

兔肺動脈成纖維細胞OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源)

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白

WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。