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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

兔退行性椎間盤髓核細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔退行性椎間盤髓核細胞分離退行性椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)ELISA試劑盒 96T/48T

Rat hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒

HumanCoisolELISAKit 人(Coisol)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCollagenaoaibody,CLAELISA試劑盒人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶比色法定量檢測試劑盒20次

Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔內(nèi)皮素-1(rabbit ET-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

兔降解產(chǎn)物(rabbit FDP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

兔促卵泡素(rabbit FSH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

兔堿性成纖維生長因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

大鼠乳酸脫氫酶A(LDHA)ELISA試劑盒 ，英文名： LDHA ELISA Kit

Mouse angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒

RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 大鼠絨毛膜β(β-CG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGzms-B(HumangranzymesB)ELISAKit人顆粒酶B規(guī)格：48T/96T

細胞同酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測試劑盒20次

RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原

NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

兔退行性椎間盤髓核細胞CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原

HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。