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兔外周血樹突狀細(xì)胞 (成熟DC細(xì)胞)

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

兔外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強(qiáng)的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ），伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細(xì)胞的信號，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，一般在30%以下。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形，樹突狀

傳代特性：屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

豚鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 ，英文名： ECP ELISA Kit

Residual human bovine serum albumin detection 人的牛血清白蛋白殘留檢測

MonkeyIerleukin-8,IL-8ELISAKit白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBLC-1/CXCL13(HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1)ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子規(guī)格：48T/96T

細(xì)菌離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次

RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

神經(jīng)營養(yǎng)素 3(-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

神經(jīng)營養(yǎng)素 4(-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

I 型膠原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

 (NO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠C-C趨化因子6(CCL6)ELISA試劑盒 ，英文名： CCL6 ELISA Kit

Mice testosterone (T) ELISA Kit 小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒

Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit 小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanichinellaaibodyELISAKit人旋毛蟲抗體規(guī)格：48T/96T

通用型小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersiniaeerocolitica)試劑盒20次

ELISAKitENA-78/CXCL5大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78規(guī)格：48T/96T

HSPD1重組小鼠 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ADM (Adrenomedullin 0.1mgADM (Adrenomedullin)(22-52) 腎上腺髓質(zhì)素(22-52)

MET重組人 c-MET / HGFR 蛋白 (aa 956-1390, His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白

IL13RA2 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔外周血樹突狀細(xì)胞 (成熟DC細(xì)胞)叉頭框蛋白O1(FOXO1)重組蛋白 Recombinant Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)

IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白

TNFSF10重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標(biāo)簽) Protein

IL8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白

SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein