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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠晶狀體上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠晶狀體上皮分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞分開；因而，晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染，保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細(xì)胞，并終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明，晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控，包括表皮生長因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠晶狀體上皮經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒

HumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISAKit 人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanaconitase2,ACO-2ELISA試劑盒人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)活性熒光定量檢測試劑盒20次

MouseangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體elisa試劑盒   小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒、小鼠抗促甲狀腺素受體抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠β淀粉樣蛋白elisa試劑盒   小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒、小鼠β淀粉樣蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠α1微球蛋白elisa試劑盒   小鼠α1微球蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠α1微球蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α1微球蛋白試劑盒、小鼠α1微球蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑elisa試劑盒   小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑試劑盒、小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠1,25二羥基3(1,25 DHVD3)ELISA試劑盒 ，英文名： 1,25 DHVD3 ELISA Kit

Mouse procalcitonin (PCT) ELISA Kit 小鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒

Mouseadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumanphospho-inhibitorysubunitofNF-KapBAlpha,pIKBAlphaELISAkit人0酸化核因子κB抑制蛋白α(IKKαhumanELISAkit)規(guī)格：48T/96

通用型組織酶1(PON1)有機(jī)0酸酶活性熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitOVAsIgE大鼠卵清蛋白特異性IgE規(guī)格：48T/96

CD2重組小鼠 CD2 / LY37 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BACE( ASP2 0.5mgBACE( ASP2 ) β分泌酶(抗原)

LGALS7重組人 Galectin-7 / LGALS7 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CXADR Protein Human 重組人 CXADR / CAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCR1 Protein Rat 重組大鼠 NCR1 / NK-p46 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠晶狀體上皮細(xì)胞BACE( ASP2 0.5mgBACE( ASP2 ) β分泌酶(抗原)

CXADR Protein Human 重組人 CXADR / CAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD2重組小鼠 CD2 / LY37 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NCR1 Protein Rat 重組大鼠 NCR1 / NK-p46 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

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原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。