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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠卵巢成纖維分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面，其主要特點(diǎn)和功能：①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng)；②卵巢損傷后，成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢；③能在卵巢炎癥時(shí)控制炎癥擴(kuò)散。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒 96T/48T

Human endostatin (ES) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒

Humanarabinogalactanproteins,AGPsELISAKit 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineapigEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 1α   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   MIP-1α/CCL3

小鼠N-甲基-D-天門冬酸受體亞單位1型   英文名稱：   Mouse N-methyl-D-aspaate receptor 1   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   NMDA-R1

小鼠去甲上腺素   英文名稱：   Mouse Nor   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   NADR

小鼠非肌性肌球蛋白重鏈9   英文名稱：   nonMyosin Heavy Chain 9   規(guī)格：   48T/96   英文縮寫：   nonMYH9hc

大鼠內(nèi)皮型合酶(NOS3)ELISA試劑盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor BB (PDGF-BB) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒

RatIerleukin23,IL-23ELISAKit 大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGLP-1HA(Mouseghcagons-likepepfide1)ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1規(guī)格：48T/96

細(xì)胞馮庫薩(VONKOSSA)鈣染色試劑盒50次

RatSomatostatin,SSELISAKit大鼠(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein

IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha 0.5mgIL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原

DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白

AARS Protein Mouse 重組小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠卵巢成纖維細(xì)胞IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha 0.5mgIL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原

CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein

AARS Protein Mouse 重組小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用