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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠膀胱平滑肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調(diào)控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細胞所經(jīng)歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構(gòu)成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠膀胱平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠膀胱平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠淋巴球性脈絡叢腦膜炎病毒抗體(LCM-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T

Globin / haptoglobin with rat (Hpt/HP) ELISA Kit 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒

Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit 人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadiposediffereiation-relatedprotein,ADRPELISA試劑盒人脂肪分化相關蛋白(ADRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白elisa試劑盒   小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白試劑盒、小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠骨退化特異標志物elisa試劑盒   小鼠骨退化特異標志物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠骨退化特異標志物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨退化特異標志物試劑盒、小鼠骨退化特異標志物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠骨特異性堿性0酸酶elisa試劑盒   小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒、小鼠骨特異性堿性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠骨橋素elisa試劑盒   小鼠骨橋素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠骨橋素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨橋素試劑盒、小鼠骨橋素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： PⅢ ELISA Kit

Mouse peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumaenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R規(guī)格：48T/96

通用型野油菜黃單孢菌柑桔致病變種(Xahomonascampesispv.cii;Xccit)試劑盒20次

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HA重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

phospha-Bcl-xL (pSer62 0.5mgphospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 0酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原

SOD1重組人 SOD1 / Superoxide Dismutase 蛋白 (His 標簽) Protein

DBI Protein Human 重組人 DBI / ACBD1 蛋白 (His 標簽)

CNTN1 Protein Human 重組人 Contactin 1 / CNTN1 蛋白 (His 標簽)

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SOD1重組人 SOD1 / Superoxide Dismutase 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。