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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織；椎體終板是椎體在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈輕度凹陷，即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋，并終生存在，即為軟骨終板，上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界，位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當(dāng)?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體，同時(shí)具有平衡分散應(yīng)力的作用。成熟的終板軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些終板軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，終板軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，終板軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠終板軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠終板軟骨采用膠原酶 - 聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒

Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanApolipoproteinC3,ApoC3ELISA試劑盒人載脂蛋白C3(ApoC3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(過(guò)氧亞硝基陰離子)20次

Humaoll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) ADI

小鼠類胰島素樣生長(zhǎng)因子 -1 (mouse IGF-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)ELISA試劑盒 ，英文名： SOCS1 ELISA Kit

Mouse glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒

MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法二步法)

細(xì)胞IRAK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-4大鼠白介素4規(guī)格：48T/96T

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠終板軟骨細(xì)胞Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用