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豬心臟瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

豬心臟瓣膜內(nèi)皮分離自心臟瓣膜組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi)，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟瓣膜在心停止的血液循環(huán)活動(dòng)中扮演的角色即普通又關(guān)鍵：瓣膜相當(dāng)于門衛(wèi)，阻止血液回流于剛剛離開(kāi)的心室。在心房與心室之間，在心室與離開(kāi)心室的血管之間，都有瓣膜。血液流過(guò)后，瓣膜就會(huì)合上常見(jiàn)的瓣膜問(wèn)題是二尖瓣脫垂，“二尖瓣"這個(gè)詞源自“主教冠"，它是主教戴的帽子，有兩個(gè)尖。位于左心房和左心室之間的瓣膜不能正常閉合。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟瓣膜內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟瓣膜內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

非凍型拭子DNA保存液（A型）

非凍型拭子DNA保存液（B型）

非凍型血液DNA保存液（100 mL）

非凍型血液DNA保存液（250 mL）

非凍型組織DNA保存液（100 mL）

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紅細(xì)胞裂解液B型（流式細(xì)胞分析用）

菌體內(nèi)毒素清除劑

土壤腐殖酸清除劑

一步離心式石蠟清除劑

動(dòng)物DNA提取

96孔板血液DNAout(真空法)（見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）

96孔板血液DNAout（離心法）（1次）

96孔板血液DNAout（離心法）（5次）

FTA血片DNAout（見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）

Southern級(jí)動(dòng)物DNAout

Southern級(jí)血液DNAout（見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）

百萬(wàn)堿基級(jí)動(dòng)物DNAout（見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）

百萬(wàn)堿基級(jí)血液DNAout（見(jiàn)關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）

TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

豬心臟瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞FAS (Apo-a1; CD95; 0.5mgFAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1

ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽) Protein

CD19 Protein Mouse 重組小鼠 CD19 / Leu-12 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSTB重組人 Cystatin B / CSTB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein