在進行分析測試方面的研究時,一般采用移液槍(pipette)量取少量或微量的液體。對于移液槍的正確使用方法及其一些細節(jié)操作,是很多人都會忽略的?,F(xiàn)在分幾個方面詳細敘述。
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時,用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的較高度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液槍。
槍頭的裝配
在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這時錯誤的做法,因為這樣會導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的道對準個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
移液槍抓握姿勢
移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,四指并攏握住移液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,排液時吸頭接觸傾斜的器壁。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。后按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。
兩種移液方法
1、前進移液法
用大拇指將按鈕按下至停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。后松開按鈕。
2、反向移液法
此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至停點排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
移液器正確放置
使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
移液器使用注意事項
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸餾水20℃時重0.9982g。
(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
(8)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
(9)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
(10)如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至較大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
(11)定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。
(12)高溫消毒之前,要確保移液器能適應(yīng)高溫。
(13)校準是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來進行。
(14)使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
1、槍頭是否匹配;
2、彈簧活塞是否正常;
3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液。
購買移液器時應(yīng)考慮的五大問題
1、在性能和人體工程學(xué)方面,新的移液器與其他的區(qū)別是什么?
2、產(chǎn)品是否與其他制造商的槍頭兼容?
3、此產(chǎn)品提供哪些類型的服務(wù)?校準?維修?
4、產(chǎn)品購買前后,生產(chǎn)商是否提供應(yīng)用技術(shù)的支持?
5、什么是產(chǎn)品的生命周期是多長?產(chǎn)品的保修期?如果公司停止生產(chǎn)該產(chǎn)品,他們會提供多少年的儀器配件和零件服務(wù)?
日常清洗和維護保養(yǎng)
為了確保移液器的準確度和度,應(yīng)根據(jù)具體使用情況進行定期保養(yǎng)。特別是在使用腐蝕性溶劑后,應(yīng)該對移液器進行清潔。通過這些簡單的清潔和保養(yǎng)方法,可適當?shù)匮娱L移液器的使用壽命。
1、外部清洗
方法:根據(jù)使用情況,可以用洗潔精清洗,或用60%異丙醇消毒,然后用雙蒸水淋洗,晾干。
2、內(nèi)部清洗
一般密封圈無需維護,活塞清洗或更換后需要涂上薄薄一層硅酮油脂(移液器每日用完后,應(yīng)旋轉(zhuǎn)到大刻度,讓彈簧恢復(fù)原形,有助于保持彈簧彈性)。針對不同性質(zhì)的液體,有不同的清洗和保養(yǎng)方法,見表。
不同性質(zhì)液體的清洗和保養(yǎng)方法
3、消毒
包括紫外消毒、高壓消毒。若移液器采用抗紫外線的高質(zhì)量材料做成,可以采用紫外消毒。高壓消毒分為整支移液器高壓滅菌消毒和半支高壓消毒。整支高壓滅菌消毒前需旋松連接部位,進行部分拆卸和半支高壓消毒;下半支可以拆卸,進行高壓消毒(121℃、20min),如有必要,將消毒部件在室溫下晾干,等到溫度*降低后再安裝。