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?原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)方面的不同之處
2024-12-17 閱讀(26)
原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)有含義、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)結(jié)果和應(yīng)用四個(gè)方面區(qū)別：
1、含義不同
原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是將培養(yǎng)物放置在體外生長(zhǎng)環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng)，中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。有幾方面含義：原代培養(yǎng)中的代并非細(xì)胞的代數(shù)，因?yàn)榕囵B(yǎng)過程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)的過程。
2、培養(yǎng)過程不同
原代培養(yǎng)的基本過程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種、加培養(yǎng)液、置培養(yǎng)條件下培養(yǎng)等步驟，在所有的操作過程中，都必須保持培養(yǎng)物及生長(zhǎng)環(huán)境的無菌。
傳代培養(yǎng)時(shí)要注意無菌操作并防止細(xì)胞之間的交叉污染。所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次最好只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。取出長(zhǎng)成單層的原代培養(yǎng)細(xì)胞，倒掉瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，加入消化液。細(xì)胞變圓，相互之間不再連片時(shí)將消化液倒掉，加入新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。
3、培養(yǎng)結(jié)果不同
原代培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)分裂。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。細(xì)胞接種后一般幾小時(shí)內(nèi)就能貼壁，并開始生長(zhǎng)，如接種的細(xì)胞密度適宜，5天到一周即可形成單層。
傳代培養(yǎng)一般傳到40到50代。一般情況，傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，2到4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
4、應(yīng)用不同
原代細(xì)胞培養(yǎng)為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段，同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐。例如，用從手術(shù)中切除的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，然后用該培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行抗癌藥物的篩選，來幫助選擇有效的化療方案。
傳代培養(yǎng)主要應(yīng)用在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，如口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重新構(gòu)建結(jié)構(gòu)復(fù)雜的牙根，還有改良羊水細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，可多次獲得有效地細(xì)胞克隆，大大提高培養(yǎng)成功率，增加了可分析核型數(shù)量，提高了產(chǎn)前診斷工作的質(zhì)量和效益。
