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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時間：2023-01-31 09:57:03瀏覽次數(shù)：144
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Tuner(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10 φX174RF Ⅰ DNA30μg
DH10B 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10 λ 噬菌體 DNAout50 次
BL21 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10 β- ，蛋白級10mL
M15 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10 α2巨球蛋白25Inh.U
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10 Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞：hFOB 1.19
貨號：BJ-X96671
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 hFOB 1.19 (人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 胎兒 組織來源 骨；成骨細(xì)胞；以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 多細(xì)胞形態(tài) 背景描述 hFOB 1.19細(xì)胞是在0.6mg/mL新G418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力；hFOB 1.19細(xì)胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長因子和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。 生物安全等級 2 [Cells contain SV40 viral sequences] 生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋0.3mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：34℃ 抗原表達(dá)情況 SV40 T antigen 基因表達(dá)情況 alkaline phosphatase 注意事項 該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高；培養(yǎng)溫度為度：33.5℃-34℃；培養(yǎng)基中添加G418。 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-11372 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM
Cy7標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG
Cy5.5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈
羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgM
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞：hFOB 1.19大鼠肝X受體β(LXRβ)elisa檢測試劑盒
大鼠肝癌源性生長因子(HDGF)elisa檢測試劑盒
大鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)elisa檢測試劑盒
大鼠肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)elisa檢測試劑盒
大鼠肝受體同源物1(LRH1)elisa檢測試劑盒
