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Human CD320 ELISA Kit

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:周經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時間:2018-05-11 13:36:36瀏覽次數(shù):130次

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產(chǎn)品簡介

Human CD320 ELISA Kit
?規(guī)格: 96T
檢測范圍: 156pg/ml→10,000pg/ml。
特異性: 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或尿液。

詳細(xì)介紹

Human CD320 ELISA Kit
規(guī)格: 96T
檢測范圍: 156pg/ml→10,000pg/ml。
特異性: 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或尿液。
Human CD320 ELISA Kit工作原理
所提供的人 CD320 ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(Enzyme
Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA)。預(yù)先包被的抗體和檢測相抗體都是多克隆抗體。檢測抗
體經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS 或 TBS 洗滌。
隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過 PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB 顯色。TMB
在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
CD320 呈正相關(guān)。

內(nèi)容

規(guī)格

數(shù)量

預(yù)包被抗  CD320抗體的 96 孔板

96T

1

凍干標(biāo)準(zhǔn)品

10ng/管

2

生物素標(biāo)記

130ul

1

親和素-過氧化物酶復(fù)合物

130ul

1

樣品稀釋液

30ml

1

抗體稀釋液

12ml

1

ABC 稀釋液

12ml

1

TMB 顯色液

10ml

1

TMB 終止液

10ml

1

洗滌緩沖液(25X)

20ml

1

封板膜

 

2

說明書

 

1

需要而未提供的試劑和器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2. 自動洗板機。

3. 恒溫箱

4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。

5. 干凈的試管和 Eppendof 管。

6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍,成 1X 洗滌緩沖液。

注意事項

1. 使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,請及時與廠家。

2. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。

3 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。

4. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

5. 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。

6. 本公司提供的 96 孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板,用戶可按需求使用;剩余的酶標(biāo)板請

 按保存條件貯存。

7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時應(yīng)避免用力過大導(dǎo)致液體濺出。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi),浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

樣品的準(zhǔn)備和保存

樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。

細(xì)胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固 30 分鐘,離心 1500×g 15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血,抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘,以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細(xì)胞裂解液——對于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后,細(xì)胞就會被裂解。對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打把細(xì)胞吹散,用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后,10000—14000g 離心 3-5 分鐘,取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

樣品稀釋的一般原則

用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測范圍。根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的

稀釋方案:

高——指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。

中——指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。

低——指待測因子在 31.2-2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。

特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,或按 1:2 稀釋。

操作程序總結(jié):

1. 加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。

2. 加生物素標(biāo)記抗體,37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。

3. 加 ABC,37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。

4. TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。

5. 加入 TMB 終止液,讀數(shù)。

人 多功能蛋白聚糖 Versican Versican

人 多環(huán)芳烴-DNA加合物 PAHs-DNA PAHs-DNA

人 多聚ADP核糖聚合酶 PARP Poly ADP ribose polymerase

人 多配體蛋白聚糖4 Syndecan-4 Syndecan-4

人 多效生長因子 PTN Pleiotrophin

人 多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶 PMN Elastase Polymorphonuclear Elastase

人 多藥耐藥相關(guān)蛋白 MRP Multidrug Resistance Associated Protein

人 多藥耐藥相關(guān)蛋白1 MRP1 Multidrug Resistance Associated Protein 1

人 惡性腫瘤特異性生長因子 TSGF Tumor Specific Growth Facter;tumor supplied group of factor

人 腭肺鼻上皮癌相關(guān)蛋白 PLUNC Palate;Lung And Nasal Epithelium Associated Protein

人 多功能蛋白聚糖 Versican Versican

人 多環(huán)芳烴-DNA加合物 PAHs-DNA PAHs-DNA

人 多聚ADP核糖聚合酶 PARP Poly ADP ribose polymerase

人 多配體蛋白聚糖4 Syndecan-4 Syndecan-4

人 多效生長因子 PTN Pleiotrophin

人 多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶 PMN Elastase Polymorphonuclear Elastase

人 多藥耐藥相關(guān)蛋白 MRP Multidrug Resistance Associated Protein

人 多藥耐藥相關(guān)蛋白1 MRP1 Multidrug Resistance Associated Protein 1

人 惡性腫瘤特異性生長因子 TSGF Tumor Specific Growth Facter;tumor supplied group of factor

人 腭肺鼻上皮癌相關(guān)蛋白 PLUNC Palate;Lung And Nasal Epithelium Associated Protein

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