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HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞（STR鑒定）

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更新時(shí)間：2018-05-23 11:32:39瀏覽次數(shù)：249次

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所在地區(qū)：上海上海市

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞（STR鑒定）HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無(wú)胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。
英文名稱(chēng)：Human Colon Cancer Cells
1） 來(lái)源：結(jié)直腸癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL

詳細(xì)介紹

HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞（STR鑒定）
英文名稱(chēng)：Human Colon Cancer Cells
規(guī)格：1*10 6  
細(xì)胞介紹
HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無(wú)胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。
一、細(xì)胞特性
1） 來(lái)源：結(jié)直腸癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細(xì)胞收到后處理
HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞（STR鑒定）在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

  1. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
  2. 存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
  3. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注：如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)。

相關(guān)細(xì)胞系列表：

小鼠肝癌細(xì)胞；Hepa1-6[Hepa1-6] 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml 6A8/6F10/1A6細(xì)胞

人前列腺癌細(xì)胞；PC-3[PC3] 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml AML12細(xì)胞

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WML6.0 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml AtT-20細(xì)胞

人胚肺成纖維細(xì)胞；CCC-HPF-1 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml B16-F1細(xì)胞

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；CHO 倉(cāng)鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml B16-F10細(xì)胞

人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株；7WPS1 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml B16-Fo細(xì)胞

人胚皮膚成纖維細(xì)胞；CCC-ESF-1 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml B82細(xì)胞

昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞；SF9 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml BA/F3細(xì)胞

人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A-375[A375] 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml Balb/3t3 clone A31細(xì)胞

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HT-29 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml BC3H1細(xì)胞

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱 顯微鏡

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