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植物RNA提取高鹽溶液

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

植物RNA提取高鹽溶液植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,會(huì)阻礙和影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已經(jīng)提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(產(chǎn)品編號(hào):3080)提取植物RNA過(guò)程中加入本產(chǎn)品,再經(jīng)過(guò)異丙醇沉淀, 可以達(dá)到去除多糖、多酚的目的,得到高純度的RNA。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 本產(chǎn)品不含DNase和RNase。

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植物RNA提取高鹽溶液

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植物RNA提取高鹽溶液

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390元

 

植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,會(huì)阻礙和影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已經(jīng)提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(產(chǎn)品編號(hào):3080)提取植物RNA過(guò)程中加入本產(chǎn)品,再經(jīng)過(guò)異丙醇沉淀, 可以達(dá)到去除多糖、多酚的目的,得到高純度的RNA。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 本產(chǎn)品不含DNase和RNase。
2. 經(jīng)本產(chǎn)品處理后的RNA純度高,可以直接用于Northern雜交、斑點(diǎn)雜交、體外 翻譯、RNA分解酶的保護(hù)分析、RT-PCR、構(gòu)建cDNA文庫(kù)等各種分子生物學(xué)實(shí) 驗(yàn)。
3. 本產(chǎn)品不能用于小分子量RNA中多糖、多酚的去除,會(huì)嚴(yán)重影響小分子量RNA的 回收率。
4. 在處理微量RNA樣品時(shí),在去除多糖、多酚的同時(shí),RNA損耗也較大,此時(shí)可以 添加產(chǎn)品微量核酸沉淀劑(CAT:50903)以提高回收率。

RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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