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柱式植物DNAout

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

柱式植物DNAout本產(chǎn)品是在LMAI Bio植物DNAOUT基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式植物基因組DNA提取產(chǎn)品,可以用于多種植物基因組DNA的超純提取。
1. 純度高,不含污染和抑制劑,得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsalite analysis等各種

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柱式植物DNAout

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柱式植物DNAout

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490元

 

本產(chǎn)品是在LMAI Bio植物DNAOUT基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式植物基因組DNA提取產(chǎn)品,可以用于多種植物基因組DNA的超純提取。
1. 純度高,不含污染和抑制劑,得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsalite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
2. 產(chǎn)率一般在10-30 μg/100 mg樣品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長(zhǎng)度一般在20-40 Kb左右。
3. 適用范圍廣,可用于絕大多數(shù)植物的各種組織,包括富含多糖的組織。
4. 不會(huì)發(fā)生離心柱堵塞現(xiàn)象,不需要使用酚和等有毒試劑。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
NP40 Lysis Buffer,High Salt(高鹽型NP40裂解液)
NP40 Lysis Buffer,Low Salt(低鹽型NP40裂解液)
NP40 Permeating Solution in PBS,10X(NP40滲透液,10X)
NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X)
Nylon Membrane Stripping Buffer,10X(尼龍膜剝離緩沖液,10X)
Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based)  
Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based)


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