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微生物實驗室物理消毒滅菌方法
2025-5-6 閱讀(50)
微生物實驗室是進(jìn)行微生物研究的場所，對環(huán)境要求很高，應(yīng)該保證實驗室內(nèi)的環(huán)境潔凈安全，嚴(yán)格的消毒滅菌工作非常重要，影響著實驗室順利研究實驗的順利進(jìn)行，同時嚴(yán)格的消毒滅菌也為實驗室工作人員提供一個清潔而良好的工作環(huán)境。
目前，常用的消毒滅菌方法多采用物理方法(如，干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過濾除菌法、射線殺菌法等)和化學(xué)方法兩大類。
1.干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120℃-150℃的高熱，并保持90-120分鐘，殺死細(xì)菌和芽孢，達(dá)到滅菌目的的一種方法。
主要適用于不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥，易于貯存。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一，在進(jìn)行動物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時，常須利用工作臺面上的酒精燈火焰對金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補充滅菌。
2.濕熱滅菌法
壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前蕞常見的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力，使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡。
適合于布類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調(diào)整為1.0-1.1 kg/cm2，維持20-30min即可達(dá)到滅菌效果。
3.過濾除菌法
是將液體或氣體通過有微孔的濾膜過濾，使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留，從而達(dá)到除菌的方法。過濾除菌法大多用于遇熱易發(fā)生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養(yǎng)液等。
目前，常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過濾除菌，或用玻璃細(xì)菌濾器、濾球負(fù)壓過濾除菌。濾膜孔徑應(yīng)在0.22-0.45μm范圍內(nèi)或用更小的細(xì)菌濾膜，溶液通過濾膜后，細(xì)菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻，并利用濾膜的吸附作用，阻制小于濾膜孔徑的細(xì)菌透過。
4.射線滅菌法
利用紫外線燈進(jìn)行照射滅菌的方法。紫外線是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物。紫外線的作用機制是通過對微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活。
適合于實驗室空氣、地面、操作臺面滅菌。滅菌時間為30min。用紫外線殺菌時應(yīng)注意，不能邊照射邊進(jìn)行實驗操作，因為紫外線不僅對人體皮膚有傷害，而且對培養(yǎng)物及一些試劑等也會產(chǎn)生不良影響。
5.化學(xué)消毒劑消毒法
化學(xué)消毒劑使用范圍比較廣泛，可用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實驗器皿等。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛、KMnO4、70%-75%乙醇、過氧乙酸、新潔爾滅、環(huán)氧乙烷、以及過氧化氫等。但是普通的化學(xué)消毒劑有殘留和腐蝕性，在使用時應(yīng)注意安全，特別是用在皮膚或?qū)嶒灢牧仙系南緞氝x用合適的藥劑種類、濃度和處理時間，才能達(dá)到安全和滅菌的目的。而目前*食品級過氧化氫消毒劑具有安全綠色無殘留的特點，可以進(jìn)行實驗材料的滅菌，同時搭配過氧化氫干霧滅菌器可以對無菌室和培養(yǎng)室的空氣消毒。
微生物實驗室是一個潔凈度要求很高的環(huán)境，對于微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，應(yīng)該經(jīng)滅菌后方能使用。
