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上海博湖生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒

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HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
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1×1063000元30 件 可售

更新時(shí)間:2024-12-06 08:02:09瀏覽次數(shù):1082

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【簡(jiǎn)單介紹】
貨號(hào) P-X724 規(guī)格 1×106
HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記公司正在出售的產(chǎn)品:NCI-H520細(xì)胞,人肺鱗癌細(xì)胞 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞 CM-R023大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 SRD5A1: 類固醇5α還原酶1抗體 CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人成纖維細(xì)胞HMF

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

產(chǎn)品名稱

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貨號(hào)

HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

1×106

P-X724

 


1、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞

培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

2、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí),棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序

降溫盒可直接放入-80℃。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

MAPK13: 原活化蛋白激酶13抗體 PON3 Others Human PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠腎管狀上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)ELISA試劑盒 CMV IgM 巨細(xì)胞病毒 IgM(捕獲法二步法)

Multicilin: 多纖毛素蛋白抗體 RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞 WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒 RV 風(fēng)疹胞病毒 IgG(間接法二步法)

MTMR8: 肌管素相關(guān)蛋白8抗體 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1

SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA 試劑盒 BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(抗原) 0.5mg

Syndecan 2/heparin sulphate protoglycans 1: 肝素糖蛋白1抗體 CTSH Others Mouse 小鼠 Cathepsin H / CTSH 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Wistar大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 Wistar rat adipose mesenchymal stem cells 人抗DNAB抗體(ai-DNase B)ELISA 試劑盒 PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(多肽抗原) 0.5mg

HFH-4: 叉頭蛋白J1抗體 羊源細(xì)胞 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC細(xì)胞 15P-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞

WFDC2 Others Canine WAP5 / WFDC2 / HE4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗BP230抗體(BP230-Ab)ELISA 試劑盒 PLGF (Placenta growth factor) 胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(多肽抗原) 0.5mg

HACAT+LUC人永生化表皮細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白 大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒 IL-1sR II  大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ 96T

PL6: 胎盤(pán)蛋白6抗體 MAPK14 Others Human p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HuTu-80 人十二指腸腺癌細(xì)胞 大鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA試劑盒 GLP-1HA(Mouse ghcagons-like pepfide 1)  小鼠胰高血糖素樣肽1 96T

PIK3AP1 0酸肌醇3激酶接頭蛋白1抗體 TE 115.T細(xì)胞,人軟組織纖維瘤細(xì)胞 SV40永生化的人胚腎上皮細(xì)胞,293T細(xì)胞 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)ELISA試劑盒 EJ/GlyRS(Human anti-EJ-antibody)  EJ抗體 CL-0064CoC1(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2






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