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食品中亞硝酸鹽含量試劑盒,微板法
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【簡單介紹】
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食品中亞硝酸鹽含量試劑盒,微板法
在食品中,亞硝酸鹽是肉制品及其他食品加工過程中常用的一種食品添加劑,但是人 體長期攝入亞硝酸鹽過量的食品,產(chǎn)生直接毒害和慢性毒害,因此硝酸鹽的檢測具有特 別重要的意義。

食品中亞硝酸鹽含量試劑盒,微板法

食品中亞硝酸鹽含量試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 食品中亞硝酸鹽含量測定試劑盒說明書 (貨號:WS1340W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 在食品中,亞硝酸鹽是肉制品及其他食品加工過程中常用的一種食品添加劑,但是人 體長期攝入亞硝酸鹽過量的食品,產(chǎn)生直接毒害和慢性毒害,因此硝酸鹽的檢測具有特 別重要的意義。 待檢樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后,在弱酸條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮 化后,再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料,在 540nm 處有特征吸收峰。進(jìn)而計(jì)算得 出亞硝酸鹽含量。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液A1 液體 13 mL×1 4℃保存 提取液A2 粉體 mg×1 4℃保存 臨用甩幾下使粉劑落入底部,再 6mL 的蒸餾水充分溶解備用。 提取液A3 粉體 mg×1 4℃保存 臨用甩幾下使粉劑落入底部,先 0.18mL 乙酸,再加 5.82mL 的蒸餾水,溶解備用。 試劑一 粉體 mg×1 4℃避光保存 臨用甩幾下使粉劑落入底部,再 5mL 20%鹽酸水溶液1mL 鹽酸緩慢加入 4mL 蒸餾水中), 充分溶解備用。 試劑二 粉體 mg×1 4℃避光保存 臨用甩幾下使粉劑落入底部,再 3mL 蒸餾水溶解備用。 標(biāo)準(zhǔn)品 粉體 mg×1 4℃保存 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板、蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、乙酸鹽酸。 四、食品中亞硝酸鹽含量測定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本處理 ① 干酪奶酪樣本:稱取約 0.3g 樣本于研缽中,加 1mL 蒸餾水研磨成勻漿后全部轉(zhuǎn)移 2mLEP 管中,再加入 0.04mL 3%乙酸溶液(0.3mL 冰乙酸緩慢加入 9.7mL 中),最后用蒸餾水定容到 2mL。4℃靜置 20min 后,除去上層脂肪,12000rpm 溫離心 10min,取上清液檢測。 ② 液體奶制品:0.5mL 樣本,加入 0.125mL 提取液 A1,混勻后加入 0.6mL 蒸餾水, 沸水浴 15min,冷卻至室溫,加入 0.05mL 提取液 A2,混勻后加入 0.05mL 提取液 A3,混勻,用蒸餾水定容到 2mL,室溫靜置 30min,除去上層脂肪,12000rpm 離心 取上清液檢測。 ③ 其他樣本:稱取約 0.1g 樣本(含水量高可取 0.5)于 2mLEP 管中,加入 0.125mL 取液 A1,混勻后加入 1.5mL 蒸餾水,組織研磨機(jī)破碎或者用研缽磨碎后再全部轉(zhuǎn) 移至 2mLEP 管中;沸水浴 15min,冷卻至室溫,加入 0.05mL 提取液 A2,混勻后 加入 0.05mL 提取液 A3,混勻,用蒸餾水定容到 2mL,室溫靜置 30min,除去上層 脂肪,12000rpm 室溫離心 10min,取上清液檢測。 【注】:若高蛋白樣本,提取后上清液依然渾濁,可以減少樣本取樣量 W,或在提取過程中將提取本試劑盒僅供科研使用 2 A2 A3 分別增加到 0.1mL(不能超過 0.1mL),蒸餾水相應(yīng)減少。 2、上機(jī)檢測: ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540nm② 標(biāo)準(zhǔn)品使用液配制:稱取 2mg 標(biāo)準(zhǔn)品至一新 EP 管中,再加 2mL 蒸餾水溶解標(biāo)準(zhǔn) 品即 1mg/mL 的亞*酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液,再用蒸餾水稀釋 500 倍(1 份母液+499 份蒸 餾水)即 2μg/mL 的亞*酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品使用液。 ③ 在 96 孔板中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 空白管 (僅做一次) 標(biāo)準(zhǔn)管 (僅做一次) 樣本 190 蒸餾水 190 標(biāo)品使用液 190 試劑一 40 40 40 混勻,室溫(25℃)準(zhǔn)確反應(yīng) 5min 試劑二 20 20 20 混勻,室溫(25℃)準(zhǔn)確反應(yīng) 15min,立即540nm 讀取吸光 A,A=A 測定-A 空白。 【注】:最*檢出限:液體乳是 0.06mg/kg;干酪及其他樣本是 1mg/kg。 五、結(jié)果計(jì)算: 1、液體樣本計(jì)算公式: 食品中亞硝酸鹽含量(以亞*酸鈉計(jì))mg/L=A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×C 標(biāo)×V÷V ×D =8×A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D 2、固體樣本計(jì)算公式: 食品中亞硝酸鹽含量(以亞*酸鈉計(jì))mg/kg=A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×C 標(biāo)×V÷W×D =4×A÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D V---提取液總體積,2mL; C 標(biāo)---標(biāo)準(zhǔn)品濃度,2μg/mL 亞*酸鈉; V ---液體樣本取樣檢測體積,0.5mLD---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; W---實(shí)際取樣質(zhì)量,g。



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