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南京億迅生物科技有限公司
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- 型號(hào) 活性氧
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 南京市
更新時(shí)間:2019-11-06 16:08:54瀏覽次數(shù):947
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活性氧(reactive oxygen species , ROS)是體內(nèi)一類氧的單電子還原產(chǎn)物,,是電子在未能傳遞到末端氧化酶之前漏出呼吸鏈并消耗大約2 %的氧生成的,包括氧的一電子還原產(chǎn)物超氧陰離子(O2·-)、二電子還原產(chǎn)物過氧化氫(H2O2)、三電子還原產(chǎn)物羥基自由基(·OH)以及一氧化氮等。
活性氧(ROS)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)原理
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,參與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。采用DCFH-DA(2,7-dichlorofuorescin diacetate)是迄今zui常用、zui靈敏的細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測(cè)探針。DCFH-DA 沒有熒光,進(jìn)入細(xì)胞后被酯酶水解為 DCFH(dichlorofluorescin)。在活性氧存在時(shí) DCFH被氧化為不能透過細(xì)胞膜的強(qiáng)綠色熒光物質(zhì) DCF(dichlorofluorescein),其熒光在激發(fā)波長(zhǎng)502nm,發(fā)射波長(zhǎng) 530nm 附近有zui大波峰,強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)活性氧水平成正比。此活性氧檢測(cè)系統(tǒng)本底低,靈敏度高,重復(fù)性好,操作簡(jiǎn)便。工作波長(zhǎng):*激發(fā)波長(zhǎng) 500、485(500±15nm),*發(fā)射波長(zhǎng) 525 (530±20 nm)。也可按照 FITC熒光檢測(cè)條件檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)原理
活性氧檢測(cè)試劑盒(ReactiveOxygenSpeciesAssayKit)是一種利用熒光探針DCFH-DA
進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
本試劑盒提供了活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測(cè)。Rosup是一種混合物(compoundmixture),濃度為50mg/ml。