Thermo NanoDrop 2000C超微量分光光度計(jì)
ND-2000是目前國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室中使用廣泛的一款微量分光光度計(jì),其*的性能、準(zhǔn)確的結(jié)果贏得了廣大用戶的好評(píng)。
Thermo NanoDrop 2000C超微量分光光度計(jì) 該產(chǎn)品可用于以下幾個(gè)方面:
* 紫外檢測(cè):常規(guī)紫外光波長(zhǎng)下檢測(cè)樣品吸光值;
* 核酸檢測(cè):可檢測(cè)dsDNA、ssDNA、RNA等不同類(lèi)型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值;
* 探針檢測(cè):檢測(cè)熒光標(biāo)記探針的吸光值,可用于去除未能標(biāo)記探針的樣品;
* 細(xì)胞培養(yǎng)物檢測(cè):檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物在600nm處的吸光值;
* 蛋白檢測(cè):檢測(cè)普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值;
* 蛋白標(biāo)記檢測(cè):可檢測(cè)被BCA、Bradford或Lowry標(biāo)定的蛋白樣品,自動(dòng)畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算出待測(cè)蛋白質(zhì)濃度。
?
NanoDrop 2000使用高能量氙燈(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光譜檢測(cè),且不需要暖機(jī),開(kāi)機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測(cè)器,檢測(cè)吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測(cè)。
待測(cè)樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的高要求,一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測(cè)前以vortex mixer震勻,若無(wú)vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動(dòng)作而斷裂,則改以55?C加熱約一分鐘,使樣品在偵測(cè)前呈現(xiàn)均勻狀態(tài),以確保 2ul 具有代表性。
檢測(cè)時(shí)選擇不同檢測(cè)模式,可以得到快速的結(jié)果:
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長(zhǎng)的吸收值及光譜(以1mm光徑吸收值呈現(xiàn))。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì),須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)(mass extinction coefficient)方可計(jì)算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長(zhǎng)吸收值結(jié)果,自動(dòng)畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square,待測(cè)蛋白質(zhì)濃度。