細胞傳代技術操作步驟：
1、紫外照射滅菌后，我們應該穿好滅菌服，戴好滅菌手套和口罩。
2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶（一般選擇處于對數(shù)期的細胞），用酒精噴壺在培養(yǎng)瓶表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶到超凈臺。
3、打開蓋子，輕輕吸出舊的培養(yǎng)液，用巴氏吸管加入適量PBS緩沖液洗滌1-2次（注意從側(cè)壁加入，以免沖掉細胞），棄去PBS緩沖液。
4、可用移液器加入1-2ml yi酶（具體量根據(jù)實驗需要確定，此處僅為參考用量），“十字"晃動，使yi酶充分接觸細胞。
5、將加入yi酶的細胞培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到倒置顯微鏡載物臺，鏡下觀察細胞消化情況，當細胞變圓且大量脫落時，準備終止消化，用75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶表面，轉(zhuǎn)移到超凈臺。
6、用移液器（或巴氏吸管）加入等量含血清培養(yǎng)基，終止消化。移液器（或巴氏吸管）充分吹打（動作也不要太猛，畢竟細胞也是蠻脆弱的），使細胞能夠全脫落。
7、將培養(yǎng)瓶中混合液體轉(zhuǎn)移至離心管中（離心管規(guī)格根據(jù)實驗需要確定），配平，離心5分鐘左右（離心機轉(zhuǎn)速根據(jù)細胞種類而定，常見的有1000rpm/min）
8、離心好后，用酒精噴壺噴灑離心管表面，轉(zhuǎn)移進超凈臺，打開蓋子，將上清液倒入廢液缸。
9、加入適量體積含血清培養(yǎng)基，用移液器或巴氏吸管輕輕吹打，制成細胞懸液。
10、將細胞懸液分裝進2個（或多個）潔凈滅菌培養(yǎng)瓶，加入適量培養(yǎng)基，蓋好蓋子
1、將分裝好的培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡載物臺，觀察細胞情況，細胞應保證一定數(shù)量，數(shù)量太少會影響生長情況。
12、在培養(yǎng)瓶上做標記，注明傳代時間，細胞種類，操作人員等信息。在放入培養(yǎng)箱之前應再次用酒精噴一噴培養(yǎng)瓶表面，然后應記得整理操作臺，用75%酒精擦拭超凈臺臺面，清理廢液和垃圾。
注意，全程嚴格無菌操作！