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上海西格生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)的方法

時(shí)間:2020/11/4閱讀:299
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小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

  本小鼠ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠TNF2α水平。用純化的大鼠TNF2α抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入TNF2α再與HRP標(biāo)記的TNF2α抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TNF2α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠TNF2α濃度。

小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng):

1. 小鼠ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請(qǐng)避光保存。

7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

小鼠ELISA試劑盒優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):

(1)、*試劑——性、靈敏性、特異性。

(2)、規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。

(3)、先進(jìn)的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)。

(4)、適用范圍——適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。

(5)、可檢測(cè)指標(biāo)齊全——生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。

(6)、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

 

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