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解讀ELISA檢測方法的原理

時間:2021/7/7閱讀:869
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ELISA法就是酶聯(lián)免疫吸附測定法的簡稱。elisa法可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的定量的實驗診斷方法。其原理是采用抗原與抗體特異反應(yīng)將待測物與酶連接,酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)。目前elisa法在臨床應(yīng)用廣泛,比如可以監(jiān)測HIV抗體、乙肝病毒抗原、破傷風(fēng)抗毒素、流感病毒的抗原。

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
優(yōu)點(diǎn):操作方便,實驗可靠,缺點(diǎn):暫未發(fā)現(xiàn)

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