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ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-10-19 09:59:16瀏覽次數(shù):568次

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公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

 產(chǎn)品名稱

 規(guī)格

 貨號

 ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞

 T25m2

XG-X6362

      描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。

      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

 

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

1,2,4-Triazole酮中氟喹唑溶液標準樣品anti- Alpha actin antibody人血凝素(HA)ELISA試劑盒

1,2-Dichloropropane;Propylene chloride醇中乙氧氟草醚溶液標準樣品anti- Alpha actin antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒

syM-Dichloroethane;Ethylene dichloride;Glycol dicholride;Ethane dichloride醇中咯菌腈溶液標準樣品anti- Alpha Actin antibody人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒

1,2-Diethylbenzene醇中抑菌靈溶液標準樣品anti- alpha Actinin antibody人鈣調(diào)酸酶(CaN)ELISA試劑盒

Propylene oxide醇中雙苯氟脲溶液標準樣品(氟酰脲)anti- alpha Adaptin antibody人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒

NA醇中微囊藻素RR溶液標準樣品anti- Alpha adducin antibody人骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒

1,3-Butadiene;Bivinyl;Divinyl;Erythrene;Biethylene;α,γ-Butadiene;Vinylethylene;Pyrrolylene水中靛藍溶液標準樣品anti- Alpha B Crystallin antibody人環(huán)酰胺(CTX)ELISA試劑盒

1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone醇中烯草酮溶液標準樣品anti- Alpha cardiac actin-specific antibody人β羥酸(β-OHB)ELISA試劑盒

ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細胞Human CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 酸化原癌基因CBL2抗體anti- PIAS2 antibodyⅣ型膠原α1(COL4α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CCKBR (Cholecystokinin B Receptor) ELISA Kit葉綠體蛋白酶抗體(植物)anti- PIAS3 antibody外皮蛋白(EVPL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CCK-8 (Cholecystokinin 8) ELISA Kitβ鏈接素相互作用蛋白1抗體anti- PIAS4 antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CETP (Cholesteryl Ester Transfer Protein) ELISA Kit酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體anti- PIAS4 antibody單核細胞趨化蛋白4(MCP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CENPF (Centromere Protein F) ELISA Kit 酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體anti- PIBF1 antibody單核細胞趨化蛋白4(MCP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit酸化N-鈣粘附分子抗體anti- PICK1 antibody型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human PC/CPG (Choline Phosphoglyceride) ELISA Kit酸化后期促進復(fù)合蛋白3抗體anti- Piezo1 antibody型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CHRM2 (Cholinergic Receptor, Muscarinic 2) ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框24抗體anti- PIF1 antibody血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

收到細胞如何處理?

1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

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